基礎(chǔ)培養(yǎng)基的詳細(xì)介紹

發(fā)布時(shí)間:2024-02-07
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(bss)基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是eearle`s mem 的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而ham`s f12 也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。mem/f12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2,形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。dulbecco`s改良培養(yǎng)基――dmem,現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞,同mem含有相同的營養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基,應(yīng)仔細(xì)了解成分表,應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*,而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域,但它對(duì)某些對(duì)*敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言,則并非*選擇,特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。 f12中含有*,據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。
在所有這些培養(yǎng)基中,*比其他氨基酸有更高的濃度,這是因?yàn)樗哂胁环€(wěn)定性以及在許多細(xì)胞培養(yǎng)中它常用作碳源。對(duì)于神經(jīng)元的培養(yǎng)常常在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(若培養(yǎng)基中這兩種物質(zhì)缺乏時(shí))。mem與f12均要用5% 的co2來平衡,dmem含更高濃度的naco3,要用10%的co2來平衡,當(dāng)然也可以在較低co2濃度下使用。這些基礎(chǔ)培養(yǎng)基的組成成分是建立在對(duì)不同細(xì)胞系生長的研究之上的,但通常在原代培養(yǎng)中使用也能有比較令人滿意的結(jié)果。
原則上,hepes作為緩沖劑可用來代替碳酸氫鹽,以解除需要高濃度co2培養(yǎng)環(huán)境的限制。實(shí)際操作中并非如此簡(jiǎn)單。顯然,溶解的co2與碳酸氫鹽對(duì)良好的細(xì)胞生長是重要的。leiboviz`s l15培養(yǎng)基可用來在大氣環(huán)境中令神經(jīng)細(xì)胞生長,該培養(yǎng)基采用了與眾不同的bss作基礎(chǔ),它含有高濃度的氨基酸來提高緩沖能力,培養(yǎng)基中使用半乳糖作碳源,以阻止培養(yǎng)基中乳酸形成,少量溶解的co2由丙酮酸代謝產(chǎn)生。這一培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)是明顯的,特別是在保持較高co2有困難時(shí),例如在長時(shí)間的顯微操作及生理學(xué)研究中。l15培養(yǎng)基已用來成功的培養(yǎng)了外周神經(jīng)元,但尚未在cns神經(jīng)元的發(fā)育研究中全面檢測(cè)過。
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