增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen簡稱pcna）由miyachi等于1978年在 sle（系統(tǒng)性紅斑狼瘡）患者的血清中發(fā)現(xiàn)并命名，因其只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名。pcna是一種分子量為36kd的蛋白質(zhì)，在細(xì)胞核內(nèi)合成，并存在于細(xì)胞核內(nèi)，為dna聚合酶的輔助蛋白。由于其在細(xì)胞核內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)，因此其抗體被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞核蛋白的內(nèi)參抗體。
如何選擇合適的細(xì)胞核內(nèi)參抗體？
常用的細(xì)胞總蛋白質(zhì)內(nèi)參有g(shù)apdh和細(xì)胞骨架蛋白β-actin或β-tubulin等。對于一些植物的樣本，則需要特別的植物actin蛋白作為內(nèi)參。當(dāng)實(shí)驗(yàn)樣品中只是核蛋白，而不是細(xì)胞總蛋白提取液時(shí)，可以用組蛋白h（histone h），或者增殖細(xì)胞核抗原（pcna）等為核內(nèi)參抗體。除了這些，其它常見的核蛋白內(nèi)參還有k70, k80, lamin a和b，在一些文獻(xiàn)報(bào)道中，erk2、tata binding protein（tbp）以及c-jun、c-fos等都有使用。但是需要注意的問題是核蛋白內(nèi)參的選擇需要考慮實(shí)際的試驗(yàn)環(huán)境，比如在涉及細(xì)胞增殖相關(guān)試驗(yàn)中，c-jun由于自身表達(dá)變化就不適合做內(nèi)參；而在凋亡實(shí)驗(yàn)時(shí)，tbp、lamin等也不適合作為內(nèi)參。
另外，我們還需要根據(jù)目的蛋白的大小選擇合適的核內(nèi)參，我們推薦內(nèi)參要與檢測的目的蛋白的分 子量相差5kd以上，因此你需要根據(jù)你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內(nèi)參。pcna的檢測分子量大約在28kd，而histone h3的檢測條帶大約在18kd，因此pcna比較適合用于檢測目標(biāo)蛋白在較大的wb實(shí)驗(yàn)，而histone h3則不適合用于13kd-23kd大小的目的蛋白內(nèi)參。另外，雖然pcna是zui合適的核內(nèi)參抗體之一，但是在某些條件下，一些影響增殖的因素會導(dǎo)致樣品間pcna含量的變化，就不適合作為內(nèi)參。
一開始購買abbkine的pcna抗體是用來做wb的，效價(jià)挺高的。后來我們使用了組織塊作為樣品做共定位，我嘗試使用該抗體對pcna做定位，做免疫組織化學(xué)，wb和ihc效果都很不錯。——中南民族大學(xué)生科院一客戶
產(chǎn)品名稱及描述 品牌 貨號 產(chǎn)品說明
anti-pcna mouse monoclonal antibody (1d7) abbkine a01040 詳情
另外，我們還需要考慮自己的需要，特別是實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。一般來說，應(yīng)用類型越多，在使用過程中的選擇余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價(jià)都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外，抗體的效價(jià)也是考察該抗體性價(jià)比的重要方面，也即相當(dāng)于實(shí)際應(yīng)用時(shí)的稀釋比率。一個(gè)效價(jià)高的100μl pcna抗體（假如其wb檢測的稀釋比率是1:5000，zui終使用液相當(dāng)于500ml），要比效價(jià)低的1ml的pcna抗體（假如wb檢測的稀釋比率是 1:200，zui終使用液相當(dāng)于2ml）性價(jià)比更高。因此在選擇抗體的時(shí)候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價(jià)，即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。
為什么選擇推薦abbkine品牌的pcna抗體？
供應(yīng)pcna抗體的品牌是比較多的，象abcam、santa cruz、cell signaling、sigma，甚至于millipore、r&d、novus、bd等都有相應(yīng)的產(chǎn)品。下面是幾個(gè)進(jìn)口品牌的簡單比較：
品牌 貨號 2013年報(bào)價(jià) 規(guī)格 應(yīng)用類型
ab29 ￥4418 100µg wb,ip, ihc
2586s ￥2997 100μl wb, if, ihc, fc
sab2502099 ￥3299 100μg wb, elisa
a01040 ￥1800 200μl wb, ihc
另外，一些國內(nèi)的供貨商也能提供分裝的pcna抗體，但是在品牌和質(zhì)量保障上都有不足。國產(chǎn)分裝的pcna抗體在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足，并且經(jīng)過分裝以后，其效價(jià)也有損失。而原產(chǎn)于國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的pcna抗體有些具有較好的檢測活性，但是在應(yīng)用類型上有差距，并且在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制，而國內(nèi)僅有的少量原產(chǎn)抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價(jià)比更高，同時(shí)也是*品牌的pcna核內(nèi)參抗體，那abbkine可能會是您的一個(gè)重要考慮選項(xiàng)之一。我們向您推薦abbkine的pcna核內(nèi)參抗體anti-pcna monoclonal antibody (1d7)（貨 號a01040）。
產(chǎn)品名稱及描述 品牌 貨號 產(chǎn)品說明
anti-pcna mouse monoclonal antibody (1d7) abbkine a01040 詳情
該抗體單克隆抗體，克隆號為1d7。其抗原為人pcna蛋白中兼具特異性和保守的一段序列，可用于小鼠、人以及大鼠樣本的wb內(nèi)參。另外，該抗體的效價(jià)非常高，wb實(shí)驗(yàn)推薦稀釋比率為1:1000-1:10,000，甚至有客戶報(bào)告更高的稀釋比率。
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該pcna內(nèi)參抗體免疫組織化學(xué)的效果也很不錯，是一款非常適合做免疫組化對細(xì)胞骨架進(jìn)行染色定位的抗體產(chǎn)品。另外，也有客戶報(bào)告使用該抗體用于組織的熒光染色，也取得了意外的效果。
abbkine還提供大包裝1ml以及更大規(guī)格定制的pcna標(biāo)簽抗體，非常適合經(jīng)常進(jìn)行內(nèi)參驗(yàn)證或校準(zhǔn)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)需求。為方便客戶的使用， 上述產(chǎn)品，abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。abbkine針對中國市場，提供化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障，如果您在使用過程中有任何問題， 請直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰尽?br>產(chǎn)品名稱及描述 品牌 貨號 產(chǎn)品說明
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美國abbkine品牌是一家提供高性價(jià)比免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌，艾美捷將其引入中國，作為其中國區(qū)域代理，將為客戶提供性 價(jià)比的常規(guī)免疫學(xué)試劑，如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗，抗體檢測底物以及相關(guān)試劑盒等。同時(shí)我們作為多家品牌的的中國代理或 區(qū)域代理，艾美捷能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣，請致電免費(fèi)客戶專線到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。