摘要:在大花蕙蘭組培快繁過(guò)程中,植物激素對(duì)原球莖的誘導(dǎo)、增殖及幼苗的分化有顯著影響。細(xì)胞分裂素6-ba和生長(zhǎng)素n從最佳配比對(duì)大花蕙蘭組織培養(yǎng)很重要,尤其是細(xì)胞分裂素影響較大。
關(guān)鍵詞:大花蕙蘭;組織培養(yǎng);植物激素
大花蕙蘭(cymbidium)是蘭科蘭屬中一部分大花附生種及其雜交種的統(tǒng)稱,屬?gòu)?fù)莖地生蘭或半附生蘭,原產(chǎn)地在喜馬拉雅山脈及東南亞高山上,是世界五大重要商品蘭花之一,近幾年在我國(guó)花卉市場(chǎng)上流行的高檔室內(nèi)盆栽花卉,具有極高的觀賞價(jià)值,株型高大雄偉,花大而多,色彩鮮艷。由于大花蕙蘭多為雜交種,種子繁殖無(wú)法保持其品質(zhì)特性,其結(jié)實(shí)率也相當(dāng)?shù)?,分株能力弱,因而繁殖系?shù)低,繁殖速度慢,遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足商品化生產(chǎn)的需求,而采用組織培養(yǎng)方法進(jìn)行原球莖增殖可以達(dá)到工廠化生產(chǎn)目的。試驗(yàn)研究植物激素對(duì)大花蕙蘭組織培養(yǎng)快速繁殖的影響,并成功地建立了快繁體系,可以用于工廠化育苗。
1材料與方法
1.1材料
大花蕙蘭采自河南農(nóng)業(yè)大學(xué)蘭花園中fn4品種,切取健康飽滿10~15cm長(zhǎng)的芽,剝?nèi)ネ獠咳~片直到5mm大小,消毒處理后作為外植體誘導(dǎo)材料。
1.2植物激素對(duì)原球莖誘導(dǎo)的影響
以ms為基本培養(yǎng)基,6-ba設(shè)0.5、1.0、1.5、2.0mg/l(單位下同)4個(gè)濃度水平,naa濃度為0.2mg/l,培養(yǎng)基均附加香蕉汁100g/l,活性炭0.5g/l,每處理接10瓶,每瓶接1個(gè)莖尖,培養(yǎng)30d后,調(diào)查原球莖誘導(dǎo)率。
1.3植物激素對(duì)原球莖增殖及幼苗分化的影響
將誘導(dǎo)的原球莖分別接種于下列不同培養(yǎng)基中:①ms+6-ba1.0+naa0.1;②ms+6-ba1.0+naa0.5;③ms+6-ba1.5+naa0.1;④ms+6-bal.5+naa0.5;⑤ms+6-ba2.0+naa0.1;⑥ms+6-ba2.0+naa0.5,以上培養(yǎng)基均加入香蕉汁130g/l,活性炭1.0g/l。每瓶接種10個(gè)原球莖,每處理10瓶,培養(yǎng)40d后,調(diào)查增殖系數(shù)及成苗數(shù)。
1.4植物激素對(duì)幼苗生根的影響
將原球莖增殖及幼苗分化培養(yǎng)中高于2cm的幼苗切出,轉(zhuǎn)接到下列生根壯苗培養(yǎng)中:①1/2ms+6-ba0.1+naa0.5;②1/2ms+6-ba0.3+naa0.5;③1/2ms+6-ba0.5+naa0.5;④1/2ms+6-ba1.0+naa0.5,每種培養(yǎng)基均附加香蕉汁150g/l,活性炭1.5g/l。每瓶接20個(gè)幼苗,每處理10瓶,30d后統(tǒng)計(jì)生根率及生長(zhǎng)情況。以上ms培養(yǎng)基中白糖濃度為30g/l,1/2ms培養(yǎng)中的白糖濃度為20g/l,瓊脂為7g/l,ph值為5.3。培養(yǎng)條件:溫度為24~26℃,光照強(qiáng)度為1000~1800lx,光照時(shí)間12~14h/d。
2結(jié)果與分析
2.1植物激素配比對(duì)原球莖誘導(dǎo)的影響
從表l可以看出,隨著6-ba濃度的增大,原球莖誘導(dǎo)率逐步增高,在6-ba1.5時(shí)達(dá)到最大,6-ba濃度再增大,原球莖誘導(dǎo)率下降,生長(zhǎng)中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞分裂素低濃度形成原球莖慢,并且誘導(dǎo)出原球莖數(shù)目少,高濃度形成愈傷多,原球莖少。在培養(yǎng)基ms+6-ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+香蕉汁100g/l+活性炭0.5g/l原球莖誘導(dǎo)率達(dá)到90%,并且每個(gè)莖尖分化出4~5個(gè)原球莖。
2.2植物激素對(duì)原球莖增殖及幼苗分化的影響
大花蕙蘭原球莖在增殖的過(guò)程中有幼苗的分化,長(zhǎng)時(shí)間不轉(zhuǎn)接,會(huì)形成很多苗,因此增殖與幼苗分化同時(shí)進(jìn)行。合理的激素配比會(huì)達(dá)到理想增殖與成苗。從表2可以看出,隨著細(xì)胞分裂素的增大,原球莖增殖系數(shù)也增大,但幼苗分化數(shù)卻隨著降低,綜合考慮增殖與成苗,培養(yǎng)基④最好,因此最佳增殖及幼苗分化培養(yǎng)基是ms+6-ba1.5mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁130g/l+活性炭1.0g/l。
2.3植物激素對(duì)幼苗生根的影響
幼苗接在4種不同的生根培養(yǎng)基上均能生根,隨著細(xì)胞分裂素濃度的增大,生根率逐漸降低,說(shuō)明細(xì)胞分裂素對(duì)生根有一定的促進(jìn)作用,但濃度加大引起增殖影響生根,培養(yǎng)基①生根率高,生根條數(shù)多,苗長(zhǎng)得好。故生根壯苗最佳培養(yǎng)基是1/2ms+6-ba0.1mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁150g/l+活性炭1.5g/l。
3小結(jié)與討論
植物激素中的細(xì)胞分裂素6-ba和生長(zhǎng)素naa對(duì)大花蕙蘭fn4組織培養(yǎng)快速繁殖影響很大。原球莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基是ms+6-ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+香蕉汁100g/l+白糖30g/l+活性炭0.5g/l+瓊脂7.0g/l,原球莖誘導(dǎo)系數(shù)可達(dá)到4~5。原球莖增殖及幼苗分化培養(yǎng)基是ms+6-ba1.5mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁130g/l+活性炭1.0g/l+白糖30g/l十瓊脂7.0g/l,探索最佳增殖與幼苗分化培養(yǎng)基中激素配比對(duì)大花蕙蘭fn4工廠化育苗有很大意義。生根壯苗培養(yǎng)基1/2ms+6-ba0.1mg/l+naa0.5mg/l+香蕉汁150g/l+活性炭1.5g/l+白糖20g/l+瓊脂7.0g/l。