表沒食子兒茶素沒食子酸醋對高糖環(huán)境下小鼠足細胞增殖和凋亡作用

發(fā)布時間:2024-01-25
目的觀察作為綠茶主要活性成分的表沒食子兒茶素沒食子酸醋(egcg)對高糖環(huán)境下足細胞增殖和凋亡的作用并探討其機制。方法將足細胞分為9組。組1:正常糖(5.6mmol/l)。組2:正常糖(5.6mmol/l)+0.1mmol/lh2o2。組3:dmem高糖(25mmol/l)。組4:20μmol/legcg+dmem高糖(25mmol/l)。組5:2.0μmol/i,egcg+dmem高糖(25mmol/l)。組6:0.2μmol/legcg+dmem高糖(25mmol/l)。組7:0.2mmol/l維生素e+dmem高糖(25mmol/l)。組8:0.1μmol/l egcg+0.1mmol/l維生素e+dmem高糖(25mmol/l)。組9:24.4mmol/l甘露醇+5.6mmol/l葡萄糖。采用溴脫氧核苷尿嘧啶(brdu)酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)檢測細胞增殖,在hoechst染色共聚焦激光顯微鏡下觀察不同濃度egcg作用24h對足細胞凋亡的影響,采用annexin v-fitc法檢測足細胞凋亡,cm—h2dcfda熒光探針檢測足細胞內(nèi)活性氧(ros)生成。結(jié)果①足細胞增殖:與組1比較,組2在刺激24h時的足細胞增殖的光密度(d)450值無顯著變化(p〉0.05),48和72h時d。s。值均顯著降低(p值均〈0.05)。與組2比較,組7和組8高糖刺激24h時的d450值顯著升高(p值均〈0.05),組4、組5和組6無顯著變化(p值均〉0.05);組4、組7和組8在刺激48、72h時的d450值顯著升高(p值均〈0.01)。②激光共聚焦顯微鏡下,凋亡細胞表現(xiàn)為較多的核固縮,dna濃縮并向核膜靠攏,核質(zhì)比減小,以及胞膜皺縮等早期凋亡形態(tài)學(xué)變化。組2、組3的足細胞凋亡較組1增加,組7明顯少于組4、組5,組9較組2無明顯增加。③不同濃度egcg作用后,組4、組5、組8的早期凋亡細胞膜聯(lián)蛋白v(+)pi(-)比例和壞死細胞膜聯(lián)蛋白v(+)pi(+)v(+)比例均顯著低于組2(p值均〈o.05);組4、組8的早期凋亡細胞膜聯(lián)蛋白v(+)pi(-)比例均顯著低于組7(p值均〈0.05)。④與組2比較,組424h時的ros顯著減少(p〈0.05),但組6無顯著改變(p〉0.05);與組7比較,組424h時的ros顯著減少(p〈0.05),6、12h時無顯著變化(p值均〉0.05)。結(jié)論egcg(20μmol/l)作用72h促進高糖環(huán)境下足細胞增殖,egcg降低高糖刺激下小鼠足細胞凋亡的作用可能是通過減少足細胞ros的生成實現(xiàn)的。完成機構(gòu):上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院腎內(nèi)科,200080
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