蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是生物體內(nèi)的功能性大分子。隨著分子生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)、生物制藥行業(yè)等研究的不斷深入，蛋白質(zhì)純化成為近年來(lái)越來(lái)越熱的研究話題。
蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細(xì)純化階段兩個(gè)階段。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細(xì)胞成分如rna、dna等分開(kāi)，常用的方法為硫酸銨沉淀法。精細(xì)純化階段的目的是把目的蛋白與其他大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區(qū)分開(kāi)來(lái)，常用的方法有：凝膠過(guò)濾層析、離子交換層析、疏水層析、親和層析等。
蛋白層析柱的特點(diǎn)：
1：耐壓高，透明
2：快速鎖定的適配器確保均一的流速和小的死體積
3：特定的裝柱器保證好的柱效
4：材質(zhì)有很好的化學(xué)耐受性
5：熱穩(wěn)定的夾套可維持一定的操作溫度
蛋白層析柱的工作流程：
1.預(yù)處理：在吸附樹(shù)脂的生產(chǎn)過(guò)程中，一般采用的是工業(yè)級(jí)原料，產(chǎn)品沒(méi)有經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化處理，樹(shù)脂內(nèi)部殘留少量單體，所以在使用之前，需用水溶性溶劑對(duì)其浸泡處理，然后用去離子水通過(guò)樹(shù)脂層，置換出水溶性溶劑離子方可投入使用。
2.逆流洗柱：用水洗出去水離子及破碎填料，樹(shù)脂裝入后，用蒸餾水反洗樹(shù)脂層，直至出水清晰、無(wú)氣味、無(wú)細(xì)碎樹(shù)脂為止。再依次用酸堿等浸泡、沖洗樹(shù)脂層，至出水呈中性為止。
3.水洗：水洗的主要目的是除去層析柱上所附著的渣滓。
4.吸附：吸附操作自上而下(或自下而上)通液，可采用不同流速，以選取條件。流出液每隔一段時(shí)間取樣檢測(cè)，達(dá)泄漏點(diǎn)停止吸附，或多柱串聯(lián)達(dá)飽和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物，該過(guò)程應(yīng)控制料液的速度及吸附量，大孔樹(shù)脂應(yīng)*浸泡在料液里，以提高吸附效果和運(yùn)行穩(wěn)定性。
5.解吸、再生：解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸劑，單柱吸附時(shí)，解吸與吸附操作對(duì)流為佳。解吸劑沸點(diǎn)要低以便回收處理。