cellsorter熒光激活高速自動(dòng)細(xì)胞分選系統(tǒng)
-微量移液器說明
cellsorter熒光激活高速自動(dòng)細(xì)胞分選系統(tǒng)配置的顯微鏡的物鏡裝有微量移液器固定裝置（cellsorter），將毛細(xì)管保持在樣品上方的光軸上?？梢允褂眉?xì)螺紋相對于物鏡手動(dòng)提升或降低毛細(xì)管。
通過這種手動(dòng)調(diào)整，我們將由白色led照明的毛細(xì)管的定位在物鏡的焦平面上，其精度受到物鏡景深的限制。
此后，將毛細(xì)管相對于物鏡固定并由顯微鏡聚焦驅(qū)動(dòng)器控制。
平行于光軸的微量移液器的定位精度由物鏡的景深（3.9 mm）和精細(xì)聚焦旋鈕決定。 當(dāng)微量移液器接近表面小于10 mm時(shí)，分選分辨率更好。
對于流體控制，cellsorter熒光激活高速自動(dòng)細(xì)胞分選系統(tǒng)使用了一個(gè)高速電磁液體閥（al3112，asco），該閥連接到一個(gè)由*（ne-1000，new era pump systems）控制的50 ml注射器上。該電磁閥的標(biāo)準(zhǔn)響應(yīng)時(shí)間為5毫秒。
根據(jù)我們的測試結(jié)果，短的可重復(fù)打開狀態(tài)的周期為8 ms。我們在分選實(shí)驗(yàn)中使用此參數(shù)值操作閥門。
通過在恒定溫度下將空氣的初始體積v0（對應(yīng)于環(huán)境壓力p0）增加到內(nèi)部v來調(diào)節(jié)注射器中的真空，從而獲得終壓力。保持一定的壓力差，比可能的管道彈性變形和在幾個(gè)拾取動(dòng)作中從皮氏培養(yǎng)皿中吸出的液體量高幾個(gè)數(shù)量級，以確保在分選實(shí)驗(yàn)期間注射器中的真空恒定。
當(dāng)拾取50個(gè)以上的細(xì)胞時(shí)，我們通過以50次拾取操作從培養(yǎng)皿中提取的液體的估計(jì)總體積（通常為50毫升）來增加其體積，從而補(bǔ)償了*中的真空損失。
我們將檢測到細(xì)胞后的分選過程的持續(xù)時(shí)間限制在15分鐘以內(nèi)，因?yàn)榛顒?dòng)細(xì)胞會(huì)依次離開其初始位置，從而導(dǎo)致微量移液器的定位不正確。
每次實(shí)驗(yàn)后，我們通過用微量移液管吸去離子水和96％的乙醇來清洗整個(gè)流體控制系統(tǒng)，以避免污染。
微量移液器可在多個(gè)實(shí)驗(yàn)中重復(fù)使用而不會(huì)發(fā)生堵塞。從培養(yǎng)皿中取出的微量移液器中的培養(yǎng)基干燥會(huì)導(dǎo)致堵塞，通?？梢杂盟芙?。微量移液器可在多個(gè)實(shí)驗(yàn)中重復(fù)使用而不會(huì)發(fā)生堵塞。