中壓制備色譜是一種廣泛應(yīng)用于藥物、化學(xué)、食品等領(lǐng)域的分離純化技術(shù)。其作用是對復(fù)雜混合物進(jìn)行分離純化，從中得到目標(biāo)化合物。
中壓制備色譜可用于分離純化天然產(chǎn)物、合成物或混合物。其作用是將復(fù)雜的混合物分離成單一化合物或純化化合物。與其他分離方法相比，中壓制備色譜具有分離效率高、選擇性好、操作簡單等特點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用于藥物、化學(xué)、食品等領(lǐng)域。
分離原理是根據(jù)化合物在不同穩(wěn)定相（固體或液體）中的分配行為，通過它們與固定在柱上的特定填料的相互作用來實(shí)現(xiàn)。填料具有不同的親和性，可以選擇性地吸附或排除不同化合物，以實(shí)現(xiàn)分離和純化目的。常用的填料有硅膠、octadecyl硅膠、石墨碳和氮化硅（c18）等。
中壓制備色譜的操作方法：
1.前處理
樣品準(zhǔn)備：為了得到準(zhǔn)確的色譜分析結(jié)果，樣品必須具有高度純度?；旌衔锟梢酝ㄟ^提取、分離和純化等方法進(jìn)行前處理。
溶劑選擇：在進(jìn)行色譜分析之前，必須選擇合適的流動(dòng)相。通常用于中壓制備色譜中的流動(dòng)相是有機(jī)溶劑（如甲醇、乙醇、醚等）和水的混合物。
2.柱選擇與填料選擇
柱選擇：柱是中壓制備色譜的核心部分。對于中壓制備色譜，通常選擇內(nèi)徑較大的柱（10-50mm）。
填料選擇：常用的填料有硅膠、octadecyl硅膠、石墨碳和c18等。選擇填料應(yīng)根據(jù)化合物的極性和化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行。
3.裝柱和校準(zhǔn)
裝柱：將選好的填料放入柱中，使之均勻分布。
校準(zhǔn)：根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適的流動(dòng)相和溫度等條件，確定最佳分離條件。
4.色譜分離實(shí)驗(yàn)
將樣品溶液加入柱中，通過未固定的化學(xué)互作用，使其分離成單一或純凈化合物。同時(shí)，記錄樣品進(jìn)入柱和流經(jīng)柱的時(shí)間，并根據(jù)判斷溶液進(jìn)出時(shí)間的間隔來評估分離效果。