分離出具生殖潛能干細胞
在母體中發(fā)育了50天的豬胎兒皮膚組織中分離出一些干細胞，這些干細胞具有某種分化成具有卵母細胞特性的細胞的內(nèi)在機制。
用誘導(dǎo)分化的條件培養(yǎng)基培養(yǎng)這些干細胞時，發(fā)現(xiàn)其中的一個亞群可以表達一些只有sheng殖細胞才能特異表達的基因和蛋白。
根據(jù)形態(tài)學觀察，發(fā)現(xiàn)所培養(yǎng)的細胞從誘導(dǎo)分化的第10天開始，形成了克隆樣結(jié)構(gòu)，其中的一些克隆樣結(jié)構(gòu)逐漸從培養(yǎng)皿上脫壁，呈“囊泡狀聚集體”懸浮于培養(yǎng)基中。在很多囊泡狀聚集體中央有一個較大的細胞，這與同sheng殖有關(guān)的卵母細胞復(fù)合體結(jié)構(gòu)非常相似。
如果將這些囊泡狀聚集體放入供卵母細胞生長的培養(yǎng)基中，經(jīng)過長時間的培養(yǎng)，囊泡狀聚集體中的細胞亞群可以將位于中央部分的大細胞擠出；進一步培養(yǎng)這些“大細胞”，最終可以長成直徑為80-100?滋m的細胞。
為了檢測這些大細胞是否表達了具有卵母細胞代表性的標記分子，將這些大細胞挑出，分組提取rna。
rt-pcr的檢測結(jié)果表明，在這些“大細胞”以及作為陽性對照的卵巢組織中，均可以檢測到所有卵母細胞特異表達的標記分子物。