高純度RNase A純化工藝方案分享

發(fā)布時(shí)間:2025-03-10
核糖核酸酶a
核糖核酸酶a(ribonuclease a,縮寫rnase a),是一種含4個(gè)二硫鍵的單鏈多肽,分子量約為13.7kda(氨基酸序列)。rnase a是一種核糖核酸內(nèi)切酶(endoribonuclease)。
核糖核酸酶層析純化思路
提取及粗純方案
我們基本采用牛胰腺硫酸銨鹽析粗提物(由mcdonald根據(jù)kunitz氏純化方法修改,“methods in enzymology”,vol.ⅱp429,1955.)。
結(jié)論:
通過對(duì)牛胰腺鹽析粗提物處理,上樣cm tanrose 6ff進(jìn)行rnase a的分離純化,其純度得到了很大的提升,去除了較多的雜蛋白,經(jīng)后續(xù)一定的處理后,跑sds-page膠,凝膠成像儀分析顯示單一條帶,符合純化要求。
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