小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子c(vegf-c)elisa定量檢測試劑盒檢測范圍:
人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、骨代謝、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研elisa檢測試劑盒。
elisa試劑盒檢測類型:雙抗體夾心法測抗原、雙抗原夾心法測抗體、間接法測抗體、競爭法測抗體、競爭法測抗原、捕獲包被法測抗體、abs-elisa法。
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子c(vegf-c)elisa定量檢測試劑盒操作步驟
1.加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔、空白孔。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔 7 孔,依次加入 100μl 不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 (見試劑準(zhǔn)備 2)??瞻卓准?100μl(見試劑準(zhǔn)備第二步*后一管),余孔加待測樣品 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜,37℃ 溫育 2 小時(shí)。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。
3.每孔加檢測溶液 a 工作液 100μl(臨用前配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃ 溫育 1 小時(shí)。
4.棄去孔內(nèi)液體,每孔用 300μl 的洗滌液洗滌,浸泡 1-2 分鐘,吸去 (不可觸及板壁) 或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次 (也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),重復(fù)洗板 3 次。*后一次洗滌后,要把孔內(nèi)的洗滌液*甩干。自動(dòng)洗板機(jī)亦可。
5.每孔加檢測溶液 b 工作液 (臨用前配制)100μl,加上覆膜,37℃ 溫育 1 小時(shí)。
6.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 5 次,方法同步驟 4。
7.每孔加底物溶液 90μl,酶標(biāo)板加上覆膜,37℃ 避光顯色 (反應(yīng)時(shí)間控制在 15-25 分鐘,不要超過 30 分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔梯度不明顯時(shí),即可終止)。
8.每孔加終止溶液 50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現(xiàn)顏色不勻一,請(qǐng)輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板以使溶液混合均勻。
9.在確保酶標(biāo)板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后,立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 (o.d. 值)。