花卉植物組織培養(yǎng)即無菌培養(yǎng),也就是要求培養(yǎng)的材料不帶有雜菌。從田間或溫室等地切取花卉材料時,應選擇健壯無病蟲母株,取幼嫩、分生能力強的部位,以利生長。
取來的材料雖經(jīng)選擇,外部總還有不少雜菌。為此,接種前應進行表面滅菌。通常先用自來水沖洗十幾分鐘,有泥的應刷去。沖洗干凈后,用70%的酒精浸泡10-15秒鐘消毒。接著用無菌水(經(jīng)高壓滅菌的蒸餾水)沖洗兩次,再用10%的漂白粉澄清液浸泡20分鐘消毒,最后用無菌水沖洗3-4次。帶有茸毛不易濕潤消毒的材料可加些洗衣粉。上述操作皆應在接種箱或超凈工作臺等無菌環(huán)境條件進行。經(jīng)過表面滅菌的材料,用無菌濾紙將水吸掉。再用解剖刀切取所需部位,通常幾毫米大小,培育無病毒苗則應在1毫米以下,然后用解剖針或槍式鑷子將材料接種到培養(yǎng)瓶上培養(yǎng)。工具用完即應在95%酒精中蘸一下,或用火焰消毒法消毒,避免工具帶菌造成交叉污染。操作時應穿工作服、戴工作帽,事先洗凈手,后再用酒精棉擦試一遍。