產(chǎn)品型號:13406.13407.13408.13409
fitc-c6(c3)-devd-fmk能提供簡便靈敏的方法對活細胞中對的caspase進行檢測。fitc-c6(c3)-devd-fmk在凋亡細胞中具有通透性,性和不可逆結(jié)合的caspase-3的特點,是帶有fitc熒光標記的caspase-3抑制劑。fitc標記能直接通過熒光顯微鏡,流式細胞儀或者熒光酶標儀測定的caspase。百螢生物是aat bioquest的中國代理商,為您提供優(yōu)質(zhì)的胱天蛋白酶caspase 3/7熒光底物 fitc-c6(c3)-devd-fmk 綠。
實驗方案
操作方法
以下協(xié)議僅提供指導,應根據(jù)您的特定需求進行修改。
使用amc,afc,pna,r110和prored底物的常規(guī)解決方案胱天蛋白酶測定
1.在dmso中準備10 mm的儲備溶液。
2.如下準備2x半胱天冬酶底物(50 µm)分析溶液:50 µl底物原液,100 µl dtt(1m),400 µl edta(100 mm),10 ml tris buffer(20 mm),ph = 7.4。
3.將等體積的半胱天冬酶標準品或樣品與2x半胱天冬酶底物測定溶液混合,并在室溫下孵育至少1小時。
4.使用熒光酶標儀監(jiān)測熒光,或使用酶標儀監(jiān)測吸光度。
使用細胞滲透性fmk caspase探針的細胞caspase測定
1.在dmso中準備2-5 mm的儲備溶液。
2.根據(jù)需要處理細胞。
3.通過用20 mm hepes緩沖液(hhbs)在hanks中稀釋dmso儲備溶液(來自步驟2.1),制備2x滲透性半胱天冬酶底物(20 µm)分析溶液。
4.將等體積的處理過的細胞與2x半胱天冬酶底物測定溶液混合(來自步驟2.3),并在37°c,5%co2的培養(yǎng)箱中孵育細胞至少1小時。
5.用hhbs清洗細胞至少一次。
6.通過流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監(jiān)測熒光強度。
使用細胞滲透性fmk caspase探針進行細胞半胱天冬酶測定(僅適用于#13470-13476)
1.通過向小瓶中加入50 µl dmso制備250x儲備液。
2.根據(jù)需要處理細胞。
3.以1:250的比例將250 x dmso儲備溶液添加到細胞溶液中(例如2 µl至500 µl細胞),并將細胞在37°c,5%co2的培養(yǎng)箱中孵育1小時。
4.用hhbs清洗細胞至少一次。
5.通過流式細胞儀,熒光顯微鏡或熒光酶標儀監(jiān)測熒光強度。
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 酶標儀 流式細胞儀 熒光顯微鏡 熒光酶標儀