發(fā)酵材料準(zhǔn)備:關(guān)于菌種及菌種的選育
發(fā)酵工藝流程如圖225所示，材料在備發(fā)稱三產(chǎn)面和的制備發(fā)酵培養(yǎng)基的切備移種谷氨能發(fā)爵過(guò)程的控材谷氮能等電點(diǎn)回權(quán)谷氫酸中和、種料味幫的結(jié)鼻與干澡損交工作任務(wù)根告單圖2-25
谷氟酸發(fā)酵工藝流程
發(fā)酵常用材料有玉米、小麥、甘薯、大米等，其中甘薯和淀粉為常用，大米進(jìn)行浸泡磨漿，再調(diào)節(jié)ph為6.0，加。于85℃液化30min，加糖化酶于60℃糖化24h，過(guò)濾后可供配制培養(yǎng)基。甘蔗糖蜜、甜萊糖蜜等糖原料不宜直接用來(lái)作為發(fā)酵的碳源，預(yù)處理時(shí)可以用活性炭、樹脂吸附或破壞，也可以在發(fā)酵液中加入表面活性吸附劑或添加。
因此，生產(chǎn)時(shí)發(fā)酵原料具有定的選擇原則。先要考慮菌體生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)，是否有利于的大量積累，還要考慮原料是否豐富、價(jià)格便宜，發(fā)酵周期是否短，產(chǎn)品是否易提取等因素。表2-21是份較為詳細(xì)的材料準(zhǔn)備單，僅供參考。
表2-21谷氯酸發(fā)酵生產(chǎn)準(zhǔn)備單
1.關(guān)于菌種
目前在發(fā)酵生產(chǎn)中所使用的菌種主要如下。
①棒狀桿菌屬：棒狀桿蔽、北京棒狀桿菌、鈍齒棒狀桿菌。
②短桿菌屬：黃色短桿菌、天津短桿菌，這些菌種具有以下共同的特征。
①細(xì)胞形態(tài)為棒狀、短桿；
②革蘭氏陽(yáng)性菌，無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛，不能運(yùn)動(dòng)；
③都是需氧型；
④都是缺陷型；
⑤緊酶強(qiáng)陽(yáng)性；⑤不分解淀粉；
⑦脫氫酶活力強(qiáng)；
⑥不分解，并能耐高濃度；
②發(fā)酵中菌體發(fā)生明顯的形態(tài)變化，同時(shí)細(xì)胞膜滲透性發(fā)生變化；
⑩cc）。固定反應(yīng)酶系活力強(qiáng)；
①乙醛酸循環(huán)弱；
②-胸戊二酸氧化缺失或敬弱。
2.菌種的選育
根據(jù)各個(gè)菌種的特征，選擇合適的菌種作為培養(yǎng)的對(duì)象很重要，因此，在生產(chǎn)實(shí)踐中，育種思路可以從以下幾個(gè)方面考慮。
是可通過(guò)誘變選育l-的結(jié)構(gòu)類似物抗性突變株和營(yíng)養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變株，以解除自身的反饋抑制和反鎖阻遏，增大1秩累量。如可以選育酮基丙二酸抗性突變株、氧肟酸鹽抗性突變株、抗性突變株等。
二是增加1的前休物的合成量，可通過(guò)選育抗、氟化鈉、氮、氟檸檬酸等突變株，以及強(qiáng)化co，固定反應(yīng)突變株（選育以琥珀酸或蘋果酸為碳源、生長(zhǎng)良好的菌株，選育氟丙酮酸敏感性突變株及選育丙酮酸缺陷、天冬氨酸缺陷突變株），使大量積累。
三是選育強(qiáng)化能量代謝的突變株。高產(chǎn)菌的兩個(gè)顯著特點(diǎn)是：a-酮戊二酸繼續(xù)向下氧化的能力峽陷和乙醛酸循環(huán)弱，使能量代謝受阻；tca循環(huán)前階段的代謝誠(chéng)慢。強(qiáng)化能量代謝，可補(bǔ)救上述兩點(diǎn)不足，使tca循環(huán)前段代謝加強(qiáng)，合成的速度加快。
四是通過(guò)選育不能以l為碳源生長(zhǎng)的突變株。由于該突變株切斷或減弱l-向下步的代謝途徑，從而使l-得到持續(xù)的積累。
另外需要注意以下幾點(diǎn)：
①菌種能高產(chǎn)，先要使菌種具備在高糖、高酸的培養(yǎng)基中仍能正常生長(zhǎng)、代謝的能力，即在高滲透壓的培養(yǎng)基中菌體的生長(zhǎng)和的合成不受影響或影響很?。?br>②選育細(xì)胞膜滲透性好的突變株；③選育減弱hmp途徑后段酶活性的突變株。