通過(guò)pcr擴(kuò)增e．coli dh5a的γ-ggt基因，產(chǎn)物經(jīng)純化后用kpn i和xho i雙酶切，回收γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶基因目的片斷，并與經(jīng)相同雙酶切的表達(dá)載體pet-32a連接，得到重組質(zhì)粒pet-ggt。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到e．coli bl21中，獲得工程菌。工程菌株經(jīng)0．05mol／l iptg，32℃誘導(dǎo)表達(dá)，濕菌體的酶活達(dá)到2．0u／g，大約是出發(fā)菌株e．coli dh5a的15倍。工程菌催化l-谷氨酰胺和鹽酸乙胺反應(yīng)生成茶氨酸的產(chǎn)量達(dá)到29．40g/l，l-gln的轉(zhuǎn)化率為48．22％，其催化l-谷氨酰胺和鹽酸乙胺反應(yīng)生成茶氨酸的能力比出發(fā)菌株e．coli dh5a提高了100多倍。完成機(jī)構(gòu)：農(nóng)業(yè)部茶葉化學(xué)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所,浙江杭州310008