超微量分光光度計原理

發(fā)布時間:2024-09-08
超微量分光光度計 -測量原理 分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。常用的波長范圍和對應的儀器分別為:
1.200~400nm的紫外光區(qū)紫外分光光度計
2.400~760nm的可見光區(qū)可見光分光光度計
3.2.5~25μm(按波數計為100000px<-1>~10000px<-1>)的紅外光區(qū)。紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
a=-log(i/io)=-lgt=klc
物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數后,可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區(qū),除某些物質對光有吸收外,很多物質本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。
超微量分光光度計
1. 所需樣品體積小,僅需1~2μl
2. 不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品自動形成液柱,檢測完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可;
3. 具有1mm和0.2mm兩個光程(電機控制自動選擇),樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規(guī)分光光度計的50倍.
4. 氙氣閃光燈為燈源,壽命長,性能穩(wěn)定
5. 不需要預熱,可隨時檢測
6. 顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)
7. 體積小:相當于一本字典大小,僅占16.5厘米實驗室空間。
關鍵詞:分光光度計 紫外分光光度計 原子吸收分光光度計 移液槍
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