酶標(biāo)免疫測(cè)定程序 將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，待其*回升至室溫后方可使用，根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~2小時(shí)。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。 按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µl到對(duì)應(yīng)的微孔中，加入*抗體50µl/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20min。 洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，加入洗滌工作液300µl/孔，每次靜置20s，甩去孔內(nèi)液體，重復(fù)洗滌3次，后一次用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。 加酶標(biāo)物：加入*酶標(biāo)物100µl/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光孵育20 min。 甩干孔內(nèi)液體，重復(fù)洗板3次，后一次用吸水紙拍干。 顯色：加入底物液a液50µl/孔，再加底物液b液50µl/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。 測(cè)定：加入終止液50µl/孔，用酶標(biāo)儀立即 測(cè)定450/630nm處的吸光度值。 注意事項(xiàng)
① 根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~3小時(shí)，體積15毫升以上的優(yōu)先從冷藏環(huán)境取出 回溫。
② 洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
③反應(yīng)終止液為2m硫酸，避免接觸皮膚。
④不使用過(guò)了有效期的試劑盒，不交換使用不同批號(hào)的試劑。
⑤ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（a450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
⑥ 在加入底物液a液和底物液b液后，一般顯色 時(shí)間為10min即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到15-20min，反之則減短反應(yīng)時(shí)間。
⑦ 底物液b液*使用變?yōu)闇\藍(lán)色時(shí)，請(qǐng)放心使用，不影響檢測(cè)結(jié)果。