紫外可見分光光度法定量分析
紫外可見分光光度法常用于定量分析，根據(jù)測量波長的范圍可分為可見光分光光度法和紫外分光光度法。前者用于有色物質(zhì)的測定，后者用于有紫外吸收的物質(zhì)的測定，兩者的測定原理和步驟相同，通過測定溶液對一定波長入射光的吸光度，依據(jù)朗伯—比爾定律，就可以求出溶液中物質(zhì)的濃度或含量。
1．單組分樣品的分析
若樣品為單組分的，且遵守吸收定律，只要測出被測物質(zhì)的吸收波長λmax，就可在此波長下，選用適當?shù)膮⒈热芤?，測量溶液的吸光度，再用標準曲線法或比較法求得分析結(jié)果。
2．多組分樣品的分析
多組分是指在被測溶液中含有兩個或兩個以上的吸光組分。進行多組分混合物定量分析的依據(jù)是吸光度具有加和性，假設(shè)樣品中同時存在兩個吸光組分x和y，需要先測定兩種組分的吸收曲線，對比其吸收波長，并計算出對應(yīng)的吸光系數(shù)。它們的吸收光譜一般有以下兩種情況：
①吸收光譜曲線不重疊。見圖1 -16(a)，若各組分的吸收曲線互不重疊，表明兩組分互不干擾，則可在各自吸收波長λ1和λ2處分別進行測定。這本質(zhì)上與單組分測定沒有區(qū)別。
②吸收曲線互有重疊。見圖1 -16(b)，若各組分的吸收曲線互有重疊，表明兩組分測定時有相互干擾，在這種情況下，需要首先測定純物質(zhì)x和y分別在λ1和λ2處的吸光系數(shù)，再分別測定溶液在λ1和λ2處的吸光度，然后根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。
用這種方夠雖可以用于溶液中兩個或兩個以上的吸光組分的同時測定，但組分數(shù)n>3結(jié)果誤差增大。近年來由于電子計算機的廣泛應(yīng)用，多組分的各種計算方法得到快速發(fā)展，提供了一種快速分析的服務(wù)。
3．高含量組分的測定-示差法
普通分光光度法一般只適于測定微量組分(10^-2～10^-64 mol/l)，當待測組分含量較高時將產(chǎn)生較大的誤差，需采用示差法。該方法適用于分析τ%<10的組分。
方法是提高入射光強度，并采用濃度稍低于待測溶液濃度的標準溶液作參比溶液。
4．雙波長分光光度法
不需空白溶液作參比，但需要兩個單色器獲得兩束單色光，雙波長分光光度法適用于混合物和渾濁試樣的測定。由于采用同一個吸收池，消除了參比液和吸收池差異的影響，提高了方法的準確度。
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