什么是人載脂蛋白A1(apo A1)elisa檢測(cè)試劑盒?

發(fā)布時(shí)間:2024-07-30
中文名:人載脂蛋白a1(apo a1)elisa檢測(cè)試劑盒
英文名:human apo a1 elisa kit
產(chǎn)品簡(jiǎn)單說明:
apo a1,載脂蛋白a1。 apo a1是血漿高密度脂蛋白(hdl)中的主要多肽。apo a1 基因的結(jié)構(gòu)和功能令人感興趣是因?yàn)樵趆dl水平和冠心病間顯示的負(fù)相關(guān)性。
267 個(gè)氨基酸的前體zui初經(jīng)過細(xì)胞內(nèi)與翻譯同時(shí)進(jìn)行的蛋白水解酶的切割成為前apoa-i。前apoa-i 從細(xì)胞中分泌,在胸導(dǎo)管淋巴中以 apoa-i1 亞型被分離。
apo a1 存在于血漿,經(jīng)歷翻譯后蛋白酶水解加工成熟為血漿 apoa-i。溴化氰對(duì)該蛋白的切割產(chǎn)生4個(gè)片段,以從 bio-gel p-30上洗脫的順序依次稱為 cnbr i、ii、iii和 iv。
人載脂蛋白a1(apo a1)elisa檢測(cè)試劑盒如何操作
1. 包被:用0.05mph9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2m硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)od值:在elisa檢測(cè)儀上,于450nm(若以abts顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔o(hù)d值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照od值的2.1倍,即為陽性。
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