為確保GIBCO澳洲胎牛血清實驗的準確性,脂肪酸的去除很關(guān)鍵

發(fā)布時間:2024-07-27
gibco澳洲胎牛血清是實驗室常用的天然培養(yǎng)基。它富含各種營養(yǎng),但也容易因母牛存在的病毒感染而攜帶有病毒,從而給細胞培養(yǎng)帶來潛在的干擾。因此,不但要從源頭上保證懷孕的母牛是健康的,沒有各種傳染病(包括沒有瘋牛病疫情),屠宰場需在政府注冊過,而且在胎牛血清的質(zhì)檢中,也要進行各種病毒檢查,以保證胎牛血清的品質(zhì)。而gibco胎牛血清的批號,則保證了每個批次的生產(chǎn)都是可以追溯的。在大部分試驗中是不需要對gibco澳洲胎牛血清中的脂肪酸進行去除的,但是在進行某些特殊細胞培養(yǎng)的時候為了保證實驗的準確性和我們要讀胎牛血清中的某些成分進行去除,常見的脂肪酸去除,我們一般用一下方法。
1、溶解:取適量的胎牛血清白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸餾水中,溶解溫度在23~27℃。 用濃度為0.2n的hcl,調(diào)節(jié)ph至3~3.5。
2、解析:充分溶解后的溶液胎牛血清白蛋白移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續(xù)攪拌,維持30min。
3、吸附:加入5%的活性炭,混勻,混懸液將混懸液移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續(xù)攪拌,維持1小時。過濾,濾渣回收后再利用。
4、濃縮:濾液用0.2n的naoh調(diào)節(jié)ph值至7.0,然后用20000分子量以下的超濾器進行超濾濃縮。
5、凍干:將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液迅速冷凍至-40℃,持續(xù)1小時左右,升到-25℃,持續(xù)10~20小時,再緩慢升溫至0℃,維持1~4小時,升溫至保存溫度20℃,分裝為成品。
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