白頭翁皂苷b采用乙醇法提取白頭翁中總皂苷,其提取率為8.白頭翁和白頭翁皂苷抑制大腸桿菌97%。經(jīng)體外抑菌試驗(yàn)表明,的數(shù)量,但對(duì)芽孢桿菌的數(shù)量無影響。
白頭翁皂苷b的提取實(shí)驗(yàn)方法
2,40下進(jìn)行酶解反應(yīng),并間歇攪拌,上清液置于水浴鍋中蒸干即得白頭翁皂苷b酶解產(chǎn)物。
白頭翁皂苷b酶解產(chǎn)物的硅膠分離
首先稱取白頭翁皂苷b酶解產(chǎn)物,放入瓷碗中并倒入適量lu仿和甲醇(1∶1)混合液攪拌使固體粉末充分溶解后,與適量80~100目的硅膠混合,樣品被硅膠吸附,在水浴鍋中蒸干,磨成均勻粉末,制成樣品膠。然后,在底部塞有棉花的硅膠柱里裝入200~300目的硅膠(分離膠),保持上表面水平,抽
將白頭翁次生苷標(biāo)準(zhǔn)品和硅膠柱分得的單糖
基白頭翁皂苷b分別配成1mg/ml的甲醇溶液待用。制流動(dòng)相時(shí),乙腈、超純水配制完成后需要用超聲波振蕩除氣。打開液相色譜分析儀,預(yù)熱20~30min;打開檢測(cè)器調(diào)整波長(zhǎng)到201nm,將流速調(diào)整到1.0ml/min,用流動(dòng)相洗柱,直至吸光值穩(wěn)定。用25μl進(jìn)樣注射器,準(zhǔn)確量取20μl待測(cè)樣品溶液,。關(guān)閉進(jìn)樣,。
白頭翁中所提取的總皂苷主要為五糖基皂苷,其得率為8.9%,tlc檢測(cè)如圖2所示;白頭翁皂苷b酶解產(chǎn)物如圖3所示,主要產(chǎn)物為低糖基皂苷和皂苷元。