為了將光漂白的影響降至低，熒光顯微鏡可以與對熒光染料無破壞性的其他技術(shù)（如微分干涉（dic），霍夫曼（hmc），透射暗場照明和相差）相結(jié)合。
這個(gè)想法是使用無損對比增強(qiáng)技術(shù)在樣本中找到特定的感興趣區(qū)域，然后在不重新定位樣本的情況下，將顯微鏡切換到熒光模式。這種類型的典型實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。圖1（a）顯示了使用相差光學(xué)成像的單層組織培養(yǎng)物中的3t3成纖維細(xì)胞。該細(xì)胞系由瑞士小鼠胚胎細(xì)胞的國立衛(wèi)生研究院（national institutes of health）線建立，該細(xì)胞高度接觸抑制，可用于涉及肉瘤病毒形成和白血病病毒繁殖的研究。圖1（b）中的顯微照片顯示了相同的視場，但是這次使用熒光照明（汞蒸氣燈和奧林巴斯wu激發(fā)塊）成像，細(xì)胞被熒光染料4'，6-二脒基-2-苯基吲哚（dapi ）一種核酸特異性染料，其發(fā)射大值為461納米，用于選擇性染色細(xì)胞核和染色質(zhì)。圖1（c）舉例說明了兩種技術(shù)的結(jié)合使用，以產(chǎn)生熒光染色的3t3細(xì)胞核的美麗的顯微照片，該細(xì)胞核疊加在成纖維細(xì)胞細(xì)胞膜和內(nèi)部細(xì)胞器的相差圖像上。該圖像用專門設(shè)計(jì)了相差環(huán)的螢石物鏡記錄，以允許同一物鏡同時(shí)觀察熒光和相差。圖1（c）舉例說明了兩種技術(shù)的結(jié)合使用，以產(chǎn)生熒光染色的3t3細(xì)胞核的美麗的顯微照片，該細(xì)胞核疊加在成纖維細(xì)胞細(xì)胞膜和內(nèi)部細(xì)胞器的相差圖像上。該圖像用專門設(shè)計(jì)了相差環(huán)的螢石物鏡記錄，以允許同一物鏡同時(shí)觀察熒光和相差。圖1（c）舉例說明了兩種技術(shù)的結(jié)合使用，以產(chǎn)生熒光染色的3t3細(xì)胞核的美麗的顯微照片，疊加在成纖維細(xì)胞細(xì)胞膜和內(nèi)部細(xì)胞器的相差圖像上。該圖像用專門設(shè)計(jì)了相差環(huán)的螢石物鏡記錄，以允許同一物鏡同時(shí)觀察熒光和相差。
圖2中示出了通常用于同時(shí)使用相差和熒光照射對樣品進(jìn)行成像的顯微鏡配置。相差使用由安裝在顯微鏡基座上的燈箱中的鎢鹵素?zé)籼峁┑耐干涔膺M(jìn)行。穿過視場光闌的光被反射鏡反射到底下聚光鏡并通過適當(dāng)尺寸的相差環(huán)。
由樣本衍射的光首先通過位于物鏡后焦平面內(nèi)的相差板，然后通過未衍射的光通過樣本，干涉中間像平面。同時(shí)，由汞燃燒器發(fā)出的紫外光通過激發(fā)濾光器，然后由分色鏡從上面反射到樣品上。由附著于染色樣本的發(fā)色團(tuán)發(fā)出的二次熒光被物鏡捕獲，并通過屏障過濾器進(jìn)入目鏡和/或觀察筒。此配置可用于單獨(dú)或組合使用技術(shù)（熒光和相差）對樣品進(jìn)行成像。