細胞培養(yǎng)小知識，你知道嗎?
什么是細胞培養(yǎng)呢?
細胞培養(yǎng)是指從動物或植物中取出細胞，然后使其在合適的人工條件下生長。這些細胞可于培養(yǎng)前直接從組織中取出來并采用酶或機械方法進行解離，或者也可來自已經(jīng)建立的細胞系或細胞株。
接下來我們一起跟隨bunsen本生了解一些細胞培養(yǎng)中的小技巧：
1、冷凍管該如何解凍? 取出冷凍管后，須立即放入37°c水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時，是否應馬上去除dmso? 除少數(shù)特別注明對dmso 敏感的細胞外，絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞)，在解凍之后，應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除dmso 即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基? 不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供的培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基， 細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的血清種類? 不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
5、何謂fbs,fcs,cs,hs? fbs(fetal bovine serum)和fcs(fetal calf serum)是相同的意思，兩者都是指胎牛血清，fcs乃錯誤的使用字眼，請不要再使用。cs(calf serum)則是指小牛血清。hs(horseserum)則是指馬血清。
6、培養(yǎng)細胞時應使用5%或10%co2?或根本沒有影響? 一般培養(yǎng)基中大都使用hco3-/co32-/h+作為ph的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中nahco3 的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的co2濃度。當培養(yǎng)基中nahco3含量為每公升3.7g時，細胞培養(yǎng)時應使用10%co2;當培養(yǎng)基中nahco3為每公升1.5g時，則應使用5%co2培養(yǎng)細胞。
7、何時須更換培養(yǎng)基? 視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。
8、培養(yǎng)基中是否須添加抗生素? 除于特殊篩選系統(tǒng)中外，一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下，培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。
9、附著性細胞繼代時所使用的trypsin-edta濃度?應如何處理? 一般使用的trypsin-edta濃度為0.05% trypsin-0.53mmedta.4 na。*次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°c，避免反復冷凍解凍造成trypsin 的活性降低，并可減少污染的機會。
10、懸浮性細胞應如何繼代處理? 一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。
細胞培養(yǎng) 本生生物公司供應：elisa試劑盒,動物血清,熒光定量pcr耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。