帶絳蟲通用pcr試劑盒實(shí)驗(yàn)使用方法:
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒rna提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(pcr前準(zhǔn)備區(qū))
取n個(gè)(n=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)pcr反應(yīng)管,每管分別加入fmd rt-pcr反應(yīng)液19μl、rt-pcr酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算n+1份fmd rt-pcr反應(yīng)液、rt-pcr酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)pcr反應(yīng)管)。
組分每頭份用量fmd rt-pcr反應(yīng)液19 μlrt-pcr酶。
1 .將所有pcr反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的pcr反應(yīng)管中分別加入待檢樣本rna提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
注:帶絳蟲通用pcr試劑盒實(shí)驗(yàn)所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。