q1 稱樣時，樣品是放在管底還是管口，如果放在管口對檢測結(jié)果有什么影響？
答：稱量過程中，樣本應(yīng)盡量稱量在試管底部，若樣本粘附在試管口，會使提取液不能與樣本充分接觸，造成提取不充分，從而影響檢測結(jié)果。
q2 是否可以將樣本提前稱量至離心管放置冰箱冷藏保存，待第二天實(shí)驗(yàn)使用？
答：建議冷凍保存，并注意避免交叉污染。
q3吸取有機(jī)試劑時，有機(jī)試劑容易從槍頭滴落，如何避免？
答：吸取有機(jī)試劑應(yīng)使用刻度吸管或瓶口分液器。使用移液器吸取有機(jī)試劑會導(dǎo)致移液器的損壞，且吸取量不準(zhǔn)確。飽和蒸氣壓越大的液體（易揮發(fā)液體）越容易出現(xiàn)液滴低落的現(xiàn)象，若必須使用移液器吸取，可將槍頭與移液器緊密連接，減輕滴落現(xiàn)象的發(fā)生。
q4 前處理時，樣本離心5分鐘和離心10分鐘有什么區(qū)別？
答：樣本前處理的目的是去除雜質(zhì)以達(dá)到試劑盒能夠檢測的狀態(tài)，離心是去除雜質(zhì)的一種手段。離心可以分離液-液，液-固等非均一體系，離心的效果與需要分離的兩相性質(zhì)有很大關(guān)系：若固體樣本的顆粒較小不易分離，則離心所需時間較長；若液體樣本與提取液極性相差較大且不易發(fā)生乳化，則離心所需時間較短。試劑盒說明書中提到的離心時間是經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證所得到的，建議按照說明書操作。
q5 離心轉(zhuǎn)速和離心力有什么區(qū)別？
答：離心轉(zhuǎn)速有相對離心力（rfc，單位g）和每分鐘轉(zhuǎn)速（rpm，單位r/min）兩種表達(dá)方式，兩者換算公式為rfc=1.118*10-6*（rpm）2*r，其中r為旋轉(zhuǎn)半徑。維德維康試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中使用的離心力為4000g，應(yīng)避免與4000r/min混淆。
q6 藥物殘留檢測實(shí)驗(yàn)中對水質(zhì)的要求：三蒸水、蒸餾水、純凈水還是去離子水？
答：理論來說這幾種水均可滿足分析要求，但對于某些項(xiàng)目有一定的區(qū)別。建議使用去離子水和三蒸水，蒸餾水和純凈水一般僅用于洗滌液的配置。
q7 器具污染所造成的原因有哪幾種？
答：①檢樣過程中出現(xiàn)含量較高的陽性樣品；
②實(shí)驗(yàn)器具沒有清洗干凈；
③實(shí)驗(yàn)人員用藥污染或其他外源性污染；
④高濃度標(biāo)品儲備液保存不當(dāng)造成污染。
建議：易被污染或使用周期較長的實(shí)驗(yàn)器具,定期（3-5個月）更新一次。
q8 同一個樣品檢測兩次，檢測值差異較大，可能是由于什么原因?qū)е碌模?br>答：正常情況下,板孔間的變異不會對樣本的檢測結(jié)果造成影響，可能造成此結(jié)果的情況有：
①某一實(shí)驗(yàn)操作前處理發(fā)生污染或失誤（稱樣量、添加樣品提取液或有機(jī)溶劑的量不準(zhǔn)確，渦動離心提取上層清液時混入大量雜質(zhì)）；
②某一實(shí)驗(yàn)檢測分析過程出現(xiàn)失誤（添加樣品的量，酶或抗體的量，添加ab液或終止液的量不準(zhǔn)）。
q9 藥殘檢測時，樣品前處理過程中所用氮?dú)饪煞裼脡嚎s空氣代替？
答：一般情況下，需要檢測的目標(biāo)物是比較穩(wěn)定的藥物，可以用壓縮空氣代替氮?dú)?。如有特殊藥物可能發(fā)生氧化影響檢測結(jié)果，則不可以使用壓縮空氣，具體藥物可向廠家咨詢。
q10 添加回收率實(shí)驗(yàn)中添加濃度如何選擇？
答：添加回收率是驗(yàn)證整個實(shí)驗(yàn)過程準(zhǔn)確度的指標(biāo)之一。添加濃度的選擇盡量避免在zui低檢測限以內(nèi)或者超出試劑盒曲線外的濃度，建議參照目標(biāo)藥物在相應(yīng)樣品中的判定限、定量限或曲線中間范圍濃度。同時，需根據(jù)具體的添加濃度對所用高標(biāo)進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?，保證添加量的準(zhǔn)確性。
添加回收的體積公式:v=c*1000m/p
其中:v為添加的高標(biāo)體積（μl），c為添加的濃度(ppb)，p為高標(biāo)的濃度(ppb)，m為樣本的質(zhì)量(g)。
q11 樣本的吸光度值為什么會超出曲線上zui大ｏｄ值？
答：①標(biāo)準(zhǔn)品回溫時間不夠；
②樣本中含有非樣本基質(zhì)的物質(zhì)，如有機(jī)溶劑；
③樣本復(fù)溶液稀釋錯誤或直接用去離子水作為復(fù)溶液；
④零標(biāo)品被污染；
⑤反應(yīng)時間錯誤；
樣本的抑制率在100%-120%范圍內(nèi)，一般可以初步判斷樣本為陰性。若大部分樣本的抑制率遠(yuǎn)超過120%，建議咨詢或重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
q12 吹干步驟為什么選擇水浴或金屬浴?
答：有機(jī)溶劑的沸點(diǎn)一般在60-90℃不等，為加快有機(jī)試劑的揮發(fā)，選擇水浴加熱或金屬浴加熱。加熱溫度應(yīng)根據(jù)待測化合物的性質(zhì)與提取試劑的沸點(diǎn)來確定，若待測化合物熱穩(wěn)定性好，不易降解或變性，可適當(dāng)提高氮吹溫度。建議使用說明書中給出的溫度。
q13 回收率能否驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)過程及數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性？
答：一般用質(zhì)控樣品（已知濃度的樣品）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來反映檢測的準(zhǔn)確性。在沒有質(zhì)控樣本對照的情況下，空白樣本添加回收率是對操作準(zhǔn)確性、操作環(huán)境及分析試劑的評價指標(biāo)之一。因此，回收率也是實(shí)驗(yàn)成功與否的一個重要判定依據(jù)。
在elisa檢測方法實(shí)際應(yīng)用過程中，回收率只是一個參考指標(biāo)，其值只要穩(wěn)定在一定范圍內(nèi)，檢測結(jié)果即具有參考性。
q14 同一個樣品，*次檢測顯示強(qiáng)陽性，第二次檢測時卻顯示陰性，什么原因？
答：①點(diǎn)樣的過程中出現(xiàn)跳孔；
②板孔出現(xiàn)較大的變異系數(shù)；
③樣本在前處理過程中被污染；
④樣本混合不均勻。
建議出現(xiàn)高陽性樣本時應(yīng)保留該樣本液，與重新處理好的樣本液一起點(diǎn)樣分析。