防止種子帶菌以防治發(fā)酵染菌
種子帶菌是發(fā)酵前期染菌的原因之。在每次接種后應(yīng)留取少量的種子懸浮液進(jìn)行平板、肉湯培養(yǎng)，以說(shuō)明是否有種子帶菌。
種子帶菌的原因主要有：保藏的斜面試管菌種染菌；培養(yǎng)基和器具滅菌不；種子轉(zhuǎn)移和接種過(guò)程染菌；種子培養(yǎng)所涉及的設(shè)備和裝置染菌。種子制備過(guò)程中，對(duì)沙士管及搖瓶要嚴(yán)格加以控制。沙士制備時(shí)，要多次間歇滅菌，確保其無(wú)菌；子瓶、母瓶的移種和培養(yǎng)時(shí)，要嚴(yán)格要求無(wú)菌操作；無(wú)菌室和搖床間都要保持清潔。
無(wú)菌室的具體要求有：無(wú)菌室面積不宜過(guò)大，般約4~6m2，高約2.6m。為了減少外界空氣的侵入，無(wú)菌室要有1~3個(gè)緩沖間。
無(wú)菌室內(nèi)部的墻壁、天花板要涂白漆或采用磨光石子，要求無(wú)裂縫，墻角好做成圓弧形，便于搭擦清洗以減少空氣中微生物的潛伏，室內(nèi)布置應(yīng)盡量簡(jiǎn)單，好能安裝空氣調(diào)節(jié)裝置，通入無(wú)菌空氣并調(diào)節(jié)室內(nèi)的溫度、濕度。無(wú)菌室的每個(gè)緩沖間般都用紫外線滅菌。通常用30w紫外線滅菌燈照射20~30min即可。
無(wú)菌室的含菌要求有：根據(jù)般工廠的經(jīng)驗(yàn)，無(wú)菌室內(nèi)無(wú)菌培養(yǎng)皿平板開(kāi)蓋放置30min后，培養(yǎng)長(zhǎng)出的菌落在3個(gè)以下為好。無(wú)菌室每次使用時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。人員進(jìn)入需要更衣，換鞋，戴帽，操作時(shí)手要用75%酒精棉擦拭干凈，用具要經(jīng)蒸汽滅菌或用滅菌劑搭擦后才能帶入使用。