中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
gb 1903.33-2022
食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)
食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑 5'-單磷酸胞苷(5'-cmp)
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于以酵母核糖核酸(rna)為原料，用核酸酶酶解生產(chǎn)制得的食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑5'-單磷酸胞苷。
2化學(xué)名稱、分子式、結(jié)構(gòu)式和相對分子質(zhì)量
2.1 化學(xué)名稱
5'-單磷酸胞苷(5'胞苷酸、5'-cmp)
2.2分子式
c9h14n3o8p
2.3結(jié)構(gòu)式
2.4相對分子質(zhì)量
323.20(按2018年國際相對原子質(zhì)量)
3技術(shù)要求
3.1 感官要求
感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。
3.2理化指標(biāo)
理化指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。
3.3 微生物指標(biāo)
微生物指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。
附錄a
檢驗(yàn)方法
a.1一般規(guī)定
本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純試劑和gb/t 6682中規(guī)定的三級水。試驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時(shí)，均按gb/t601、gb/t 602、gb/t 603的規(guī)定制備。試驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。
a.2鑒別實(shí)驗(yàn)
按gb/t 6040規(guī)定方法執(zhí)行，產(chǎn)品紅外光譜應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品紅外光譜(標(biāo)準(zhǔn)品紅外光譜圖參見附錄b)一致。
a.3 5'-單磷酸胞苷(c9h14n3o8p)(以干基計(jì))的測定
a.3.1試劑和材料
a.3.1.1水：符合gb/t 6682-2008 的一級水。
a.3.1.2 2 mol/l氫氧化鈉溶液：稱取40 g固體氫氧化鈉于500 ml容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，搖勻。
a.3.1.3 0.05 mol/l磷酸二氫鉀溶液：稱取6.804 5 g磷酸二氫鉀(kh2po4)于1 l容量瓶中，用水溶解并定容至刻度.搖勻后用0.45 μm微孔膜過濾。使用前用超聲波超聲脫氣30 min。
a.3.1.4 5'-單磷酸胞苷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(純度≥98%)。
a.3.1.5 5'-單磷酸胞苷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：精確稱取5'-單磷酸胞苷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)100.0 mg于50 ml容量瓶中，用水溶解并加入2 mol/l氫氧化鈉溶液1滴~2滴助溶，定容至刻度，混合均勻，密封后貯于4℃冰箱中備用。
a.3.1.6 5'-單磷酸胞苷標(biāo)準(zhǔn)使用液：準(zhǔn)確吸取1.0 ml 5'-單磷酸胞苷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于50 ml容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。進(jìn)樣前用0.45μm微孔膜過濾。
a.3.2儀器和設(shè)備
a.3.2.1高效液相色譜儀(紫外檢測器)。
a.3.2.2分析天平(感量0.000 1 g)。
a.3.3參考液相色譜條件
a.3.3.1色譜柱：c18(4.6 mm×250 mm，5 μm)或相當(dāng)型號色譜柱。
a.3.3.2流動(dòng)相：0.05 mol/l kh2po4溶液+甲醇=95+5。
a.3.3.3進(jìn)樣量：20μl。
a.3.3.4流速：0.8 ml/min。
a.3.3.5紫外檢測波長：254 nm。
a.3.3.6柱溫箱溫度：25℃。
a.3.4 試樣制備
樣品儲(chǔ)備液：精確稱取樣品100.0 mg于50 ml容量瓶中，用水溶解并加入2 mol/l氫氧化鈉溶液1滴~2滴助溶，定容至刻度，混合均勻。
樣品使用液：準(zhǔn)確吸取1.0 ml樣品儲(chǔ)備液于50 ml容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。進(jìn)樣前用0.45 μm微孔膜過濾。
a.3.5 測定
按a.3.3的色譜條件將5'-單磷酸胞苷標(biāo)準(zhǔn)使用液和樣品使用液分別進(jìn)樣。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間，確定樣品5'-單磷酸胞苷的色譜峰。根據(jù)樣品的峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算樣品中5'單磷酸胞苷的含量。
a.3.6結(jié)果計(jì)算
5'-單磷酸胞苷含量(以干基計(jì))的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w1按式(a.1)計(jì)算。
式中：
a——樣品使用液5'-單磷酸胞苷的峰面積；
ms——標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)5'-單磷酸胞苷的質(zhì)量，單位為克(g)；
r——標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)5' -單磷酸胞苷的水分，%；
as——標(biāo)準(zhǔn)使用液5'-單磷酸胞苷的峰面積；
m——樣品5'-單磷酸胞苷的質(zhì)量，單位為克(g)；
ri——樣品5'-單磷酸胞苷的水分，%。
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過0.5%。
a.4紫外吸光度比值的測定
a.4.1試劑和材料
鹽酸溶液：0.01 mol/l。
a.4.2儀器和設(shè)備
紫外分光光度計(jì)。
a.4.3分析步驟
吸取樣品儲(chǔ)備液(a.3.4)1.0 ml于100 ml容量瓶，用鹽酸溶液定容至刻度，搖勻。用紫外分光光度計(jì)分別測定250nm、260nm、280nm波長處的吸光度。
用鹽酸溶液作空白對照。
a.4.4 結(jié)果計(jì)算
250nm吸光度和260nm吸光度的比值x1按式(a.2)計(jì)算。
式中：
a250——250nm處樣品的吸光度；
a260——260nm處樣品的吸光度。
在波長280 nm和260 nm處的吸光度比值x2按式(a.3)計(jì)算。
式中：
a280——280 nm處樣品的吸光度；
a260——260nm處樣品的吸光度。
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過2%。
a.5 ph的測定
a.5.1 儀器和設(shè)備
a.5.1.1酸度計(jì)(分度值0.01 ph)。
a.5.1.2分析天平(感量0.01 g)。
a.5.1.3 超聲波清洗器。
a.5.2 分析步驟
稱取1.0g樣品于250 ml錐形瓶中，加100 ml水，在超聲波清洗器中超聲使之完全溶解，冷卻至室溫，然后用酸度計(jì)測定溶液的ph。
同一樣品兩次測定值之差不應(yīng)超過20%。