毛細(xì)管電泳儀的故障排除

發(fā)布時(shí)間:2024-07-17
毛細(xì)管電泳分離的檢測原理基于被測組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同,當(dāng)被測組分通過檢測窗時(shí),吸光度發(fā)生的變化服從朗伯-比爾定律,即在定的實(shí)驗(yàn)條件下,吸光度與被測組分的濃度成正比。故障排除:
一、無電泳峰:
1、檢查結(jié)果:沒有電流。
可能原因:毛細(xì)管堵塞或斷裂。
解決方案:用水沖洗毛細(xì)管,觀察是否有水流出。若無水流出,拆下卡盒檢查毛細(xì)管兩端和窗口是否斷裂。若毛細(xì)管沒斷裂,可用水反向高壓沖洗。緩沖液需過濾,將樣品過濾或離心去除其中的顆粒。
2、檢查結(jié)果:電流波動很大,甚至幾乎消失。
可能原因:緩沖液中有氣泡產(chǎn)生或區(qū)帶中樣品析出。
解決方案:將緩沖液超聲脫氣,如果還有此現(xiàn)象發(fā)生,則可能是區(qū)帶中樣品析出,可降低樣品濃度。對于在緩沖液中溶解度不高的樣品,需在緩沖液中加入添加劑。
3、檢查結(jié)果:電流初始值較小,后逐漸增大。
可能原因:樣品進(jìn)樣量過大。
解決方案:減少進(jìn)樣量。
二、電泳峰拖尾:
1、可能原因:毛細(xì)管窗口未開或窗口位置不正。
解決方案:打開毛細(xì)管檢測窗口或調(diào)整窗口位置。
2、可能原因:樣品在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附。
解決方案:對于蛋白質(zhì)和核酸樣品,應(yīng)盡量采用涂層毛細(xì)管、ph條件或動態(tài)涂層,防止樣品吸附。
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