百合是重要的切花、盆花和庭院用植物材料。傳統(tǒng)的百合繁殖方法如分球、分珠芽或鱗片扦插、鱗片包埋等，存在繁殖系數(shù)較小，多代繁殖常造成退化以及種間雜交不親合等問題。采用組織培養(yǎng)進(jìn)行百合的快速繁殖和脫毒復(fù)壯，可促進(jìn)百合商品種球的生產(chǎn)和百合新品種的培育。
以東方百合和亞洲百合為試材，采用鱗片作為外植體，研究不同濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比對(duì)兩種百合不定芽的誘導(dǎo)、芽的增殖和生根的影響，并摸索組培苗移栽的適宜條件，篩選出適合各階段的培養(yǎng)基及移栽基質(zhì)。
不同培養(yǎng)基對(duì)不定芽分化的影響
剝?nèi)o菌苗小鱗莖中間層小鱗片，切取鱗片基部約0.5～0.8cm2大小的方塊作為外植體，接種于添加不同濃度6-ba和naa的ms基礎(chǔ)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，觀察不同濃度6-ba和naa對(duì)鱗片不定芽分化的影響。培養(yǎng)10天后，外植體基部表面不同程度地出現(xiàn)了小突起，3～4周時(shí)部分小突起發(fā)育成不定芽，不定芽的發(fā)生情況見表1和表2。
由表1可以看出，東方百合鱗片在不添加任何植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的ms培養(yǎng)基上也有不定芽的發(fā)生，但是芽再生率較低且再生芽生長(zhǎng)較弱。添加適量的6-ba與naa有利于不定芽的誘導(dǎo)。6-ba濃度為0.1mg/l時(shí)，所有組合都獲得100%芽再生率，平均每個(gè)外植體獲得的不定芽數(shù)在naa濃度為0.5mg/l時(shí)最多，為3.5個(gè)。6-ba濃度達(dá)到0.5mg/l時(shí)，不定芽呈叢狀生長(zhǎng)，生長(zhǎng)較弱。
對(duì)于亞洲百合，由表2可以看出，不同濃度6-ba和naa配比，芽再生率及平均每個(gè)外植體再生的不定芽數(shù)不同。6-ba與naa的比值大于或等于1.0時(shí)，芽再生率較高，在6-ba濃度為1.0mg/l、naa濃度為1.0mg/l時(shí)達(dá)到最高，為100%。6-ba濃度低于1.0mg/l，naa濃度低于6-ba濃度時(shí)，不定芽的再生情況較好，兩者的濃度都為0.5mg/l或1.0mg/l時(shí)獲得較多生長(zhǎng)健壯的不定芽，分別為4.0和4.3；6-ba濃度達(dá)到1.5mg/l，不定芽生長(zhǎng)較弱，并且出現(xiàn)不同程度的玻璃化現(xiàn)象。
與亞洲百合相比，東方百合小鱗片不定芽分化在添加較低濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上即可獲得較好的結(jié)果，在本研究中，最適培養(yǎng)基為ms+0.1mg/l6-ba+0.5mg/lnaa，而亞洲百合小鱗片不定芽分化的最適培養(yǎng)基為ms+1.0mg/l6-ba+1.0mg/lnaa。
不同濃度6-ba對(duì)不定芽增殖的影響
將東方百合和亞洲百合鱗片外植體上產(chǎn)生的不定芽接種到添加不同濃度6-ba和naa的ms培養(yǎng)基上進(jìn)行不定芽的增殖培養(yǎng)。結(jié)果表明，兩種百合的不定芽在不同濃度6-ba下都實(shí)現(xiàn)了增殖。東方百合在6-ba濃度較低時(shí)獲得較高的增殖倍數(shù)，6-ba為0.1mg/l時(shí)增殖倍數(shù)最高，為3.9；亞洲百合不定芽增殖需要的6-ba濃度比東方百合的高，濃度為0.5mg/l時(shí)獲得的增殖倍數(shù)最高，為3.4。
不定芽生根培養(yǎng)及移栽
不定芽在不同生根培養(yǎng)基上的生根情況表明，東方百合不定芽在ms基礎(chǔ)培養(yǎng)基上的生根情況優(yōu)于1/2ms基礎(chǔ)培養(yǎng)基，適當(dāng)添加一定量的6-ba更有利于東方百合的生根，在添加0.1mg/l6-ba和0.2mg/lnaa的ms培養(yǎng)基上，東方百合不定芽的生根情況最好；亞洲百合不定芽在ms培養(yǎng)基及添加0～0.5mg/lnaa的1/2ms培養(yǎng)基上都能生根，其中以在添加0.2mg/lnaa的1/2ms培養(yǎng)基中生根數(shù)量最多，且植株生長(zhǎng)健壯，利于移栽。
當(dāng)組培苗的根長(zhǎng)長(zhǎng)至1～2cm后即可進(jìn)行馴化移栽。移栽前先開瓶煉苗，煉苗結(jié)束后洗凈根上的培養(yǎng)基，然后移栽至不同基質(zhì)中。移栽初期的小苗必須給予精心管理，保證充足的光照和空氣濕度，讓小苗慢慢適應(yīng)外界環(huán)境，移栽后期對(duì)成活的小苗也要用心管理才能保證小苗的正常發(fā)育，忌大旱大澇。移栽45天后統(tǒng)計(jì)移栽成活率，以蛭石∶土為1∶1作為基質(zhì)時(shí)，移栽成活率在80%左右，而以蛭石∶珍珠巖為1∶1作為基質(zhì)時(shí)移栽成活率大于95%。