上海旦鼎為您詳細(xì)講解：abi7500pcr儀校準(zhǔn)和使用方法
q:7500快速定量pcr儀可以使用0.2ml pcr反應(yīng)管或者96孔板嗎?
a:不可以，7500 快速定量pcr儀只支持0.1ml pcr反應(yīng)管或者96孔板
q:如何監(jiān)控反應(yīng)體系是否有蒸發(fā)?
a:查看rox信號(hào)是否在整個(gè)pcr過程中保持一致。在多組分圖譜界面，選擇單孔，如果rox信號(hào)逐漸增高，代表樣品孔中有蒸發(fā)。如下圖所示:
q:內(nèi)參基因與目標(biāo)基因是否需要在相同的反應(yīng)板上運(yùn)行相對(duì)定量?
a:是，內(nèi)參基因必須和目標(biāo)基因在相同的反應(yīng)板上。軟件可以根據(jù)在相同反應(yīng)板上的內(nèi)參基因和目標(biāo)基因自動(dòng)進(jìn)行相對(duì)定量計(jì)算，并計(jì)算估值區(qū)間。
q:定量pcr系統(tǒng)支持的熒光染料有哪些?
a:下面是實(shí)時(shí)定量pcr儀器能夠檢測(cè)染料的表:
dye
7300
7500
7900
cy3™
x
cy5™
x
fam™
x
x
x
joe™
x
x
x
ned™
x
x
x
rox™
x
x
x
sybr® green i
x
x
x
tamra™
x
x
x
texas red®
x
tet™
x
vic®
x
x
x
q:用戶是否可以添加自定義染料?
a:可以，可以添加自定義染料，但染料的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)必須與儀器的濾光片設(shè)置兼容。
q:常用熒光染料的發(fā)射波長(zhǎng)為多少?
a:
染料名稱
發(fā)射波長(zhǎng)(nm)
fam™
~520
sybr® green i
~520
tet™
~540
joe™
~550
vic®
~550
ned™
~580
cy3™
~580
tamra™
~580
rox™
~610
texas red®
~610
cy5™
~670
q:abi各種型號(hào)的定量pcr儀有什么特點(diǎn)?
a:
◆ 7300、7500、7500 快速系統(tǒng)是用鹵鎢燈作為激發(fā)光源，并利用濾光片檢測(cè)激發(fā)熒光
◆ 7300是一個(gè)激發(fā)光和四色濾光片
◆ 7500和7500快速有五個(gè)激發(fā)光和五個(gè)濾光片，所以可以檢測(cè)遠(yuǎn)紅外。
◆ 7900ht系統(tǒng)是用氬離子激光作為激發(fā)光源，可以掃描500nm -650nm所有波長(zhǎng)的熒光
◆ 7900ht系統(tǒng)可以提供更高通量，如 384孔板和低密度芯片升級(jí)，以及自動(dòng)手臂來裝載反應(yīng)板設(shè)備
q:bhq作為探針的淬滅基團(tuán)，在abi定量pcr系統(tǒng)如何設(shè)定?
a:淬滅基團(tuán)設(shè)為none。
q:7300/7500/7900ht定量pcr系統(tǒng)軟件生成的文件有哪些?
a:針對(duì)7300 v1.4及以下版本軟件，7500 v1.4 及以下版本軟件，7900ht軟件生成的文件，包含擴(kuò)增曲線的為數(shù)據(jù)文件，以 sds為文件后綴。相對(duì)定量分析產(chǎn)生以sdm為后綴文件，設(shè)置模板以 sdt為后綴。
針對(duì)7500 v2.0版本軟件，包含擴(kuò)增曲線的為數(shù)據(jù)文件，以 eds為文件后綴。相對(duì)定量分析產(chǎn)生以edm為后綴文件，設(shè)置模板以 edt為后綴。