肉制品中總脂肪的測定
本篇文章介紹了一種簡單可靠的肉制品脂肪測定方法。樣品用酸水解儀 h-506 進行水解。索氏提取使用脂肪萃取儀 e-500 進行。在萃取物干燥至恒定重量后，按重量計算總脂肪含量。使用水解儀 h-506 和脂肪萃取儀 e-500 提高了樣品處理量。
1
設(shè)備
水解儀 h-506
脂肪萃取儀 e-500
均質(zhì)儀 b-400
分析天平 (精度 ± 0.1 mg)
真空烘箱
玻璃砂芯支架
2
化學(xué)品及試劑
化學(xué)品及試劑：
石英砂，粒度 0.3-0.9mm
硅藻土® 545
鹽酸 4mol/l
石油醚 40-60
乙醚
為了安全操作，請注意所有相應(yīng)的 msds。
樣品：
熟腸，申報脂肪含量27.46g/100g(+/-0.595 g/100g)
香腸，申報脂肪含量 20g/100g
碎牛肉，申報脂肪含量 13g/100g
3
過程
測定脂肪包括以下步驟：
樣品均質(zhì)
用 4 m hcl 水解樣品，使脂肪游離出來
索氏提取脂肪
脂肪含量計算
3.1 樣品均質(zhì)
將樣品用均質(zhì)儀 b-400 均質(zhì)一次，持續(xù) 2 秒
3.2 酸水解
準(zhǔn)備玻璃砂芯
添加約 20g 石英砂放入玻璃砂芯底部，將玻璃砂芯輕輕敲在桌面上，使其壓實
添加約 2 克硅藻土，用勺子均勻涂抹
在樣品管中放入 2 克硅藻土
在樣品管中加入 10 克均質(zhì)后的樣品，并準(zhǔn)確稱量樣品重量
加入 50 毫升鹽酸(4m)，混勻樣品管形成懸浮液
再加入 50 毫升鹽酸(4m)，確保將所有的樣品從玻璃壁上沖洗
預(yù)熱 h-506 10 分鐘
將樣品管放入儀器中
連接吸氣管，啟動真空泵
當(dāng)一個位置開始沸騰時，將加熱降低 2 檔
每個位置恒定加熱沸騰將樣品酸水解 30 分鐘
在酸水解結(jié)束時，向每個樣品管中加入 50ml 溫水
關(guān)閉加熱，將樣品管提升起來后進行抽濾樣品
緩慢加入至少 400ml 水來清洗每個樣品管，洗滌直到達到中性 ph 值
從水解儀 h-506 中取出玻璃砂芯。
用ph試紙在砂芯底部檢查 ph 直到中性
用刮刀攪拌硅藻土層(不要接觸到石英砂層)使樣品拌均勻
用濾紙小心地擦拭刮刀，并將濾紙一并放入玻璃砂芯中
在真空烤箱(100°c/200 mbar 下 2 小時)，烘箱(100°c 下 4 小時)干燥玻璃砂芯
不建議在高溫下快速干燥，因為脂肪在 105°c 以上的溫度下會分解
讓玻璃砂芯在干燥皿冷卻至室溫
在玻璃砂芯最上方鋪一層石英砂(20克)，防止硅藻土在萃取過程中被沖起
3.3 索氏提取脂肪
3.3.1 準(zhǔn)備加熱溶劑杯
必須使用干燥和清潔的燒杯進行索氏提取。在 102°c 下烘干至少 30 分鐘。讓它們在干燥皿中冷卻至室溫至少 1 小時，提取前記錄準(zhǔn)確的燒杯重量。
索氏萃取
將裝有樣品的玻璃樣管放入提取室，將液位傳感器調(diào)整到樣品高于樣品 1-2cm (見圖1)。將溶劑直接倒入燒杯，放在相應(yīng)的加熱板上。關(guān)閉防護罩。(溶劑也可從上方冷凝器口中進行添加)
按 表1 所列參數(shù)，激活所選的位置，打開冷卻水或接通冷水機，啟動儀器。
▲圖1：調(diào)整索氏提取的液位傳感器
表1：脂肪萃取儀 e-500 索氏提取的參數(shù)
步驟
參數(shù)
加熱等級 [-]
溶劑
石油醚/ 乙醚
_
萃取
20 循環(huán)
5 - 63
淋洗
5 min
5 - 63
智能干燥
on4
-
溶劑體積 [ml]
100
_
3.3.2 干燥提取樣品
將含有樣品的燒杯放入烘箱中，在 102°c 下烘干恒重。讓燒杯在干燥皿中冷卻到室溫至少 1 小時，并記錄最后重量。
確保抽提前后燒杯在干燥器中的冷卻時間相同，燒杯溫度的差異會造成結(jié)果偏差。
3.4 計算
結(jié)果根據(jù)公式計算脂肪的百分比 （1）
% fat：樣品中的脂肪含量
mtotal：燒杯+提取物重量 [g]
mbeaker：空的燒杯重量
[g] m樣品：樣品重量 [g]
4
結(jié)果
測定的脂肪含量與申報的樣品的規(guī)定值相符。根據(jù)所使用的溶劑類型，脂肪含量會有微小的差異。這是因為溶劑極性對萃取過程中傳質(zhì)的影響。結(jié)果如表2 - 7所示。
表2：測定熟腸(規(guī)格：27.46±0.60 g/100g)的脂肪含量，用石油醚 40/60 萃取
_ m樣品 [g]
m燒杯[g]
mtotal[g]
% fat
樣品 1
3.4465
110.7764
111.7338
27.78
樣品 2
3.4584
110.8143
111.7797
27.91
樣品 3
3.2385
110.2852
111.1879
27.87
平均值
_ 110.8143
_ 27.86
sd
3.4465
_
_ 0.07
rsd [%]
_
_ 111.7797
0.25
表3：用乙醚提取熟腸(規(guī)格:27.46±0.60 g/100 g)測定脂肪含量
_ m樣品 [g]
m燒杯[g]
mtotal[g]
% fat
樣品 1
3.5497
110.0478
111.0399
27.95
樣品 2
3.5504
110.8537
111.8485
28.02
樣品 3
3.6765
111.1559
112.1926
28.20
平均值
_ 110.8537
_ 28.06
sd
3.5497
_
_ 0.13
rsd [%]
3.5504
_
_ 0.46
表4：測定香腸的脂肪含量(規(guī)格:20g/100g)，用石油醚 40/60 提取
_ m樣品 [g]
m燒杯[g]
mtotal[g]
% fat
樣品 1
4.4545
113.1815
114.1887
22.61
樣品 2
4.4867
110.9212
111.9420
22.75
樣品 3
4.5070
113.9888
115.0054
22.56
平均值
_
_
_ 22.64
sd
_
_ 114.1887
0.10
rsd [%]
4.4867
110.9212
111.9420
0.45
表5：測定熟腸(規(guī)格：27.46±0.60 g/100g)的脂肪含量，用石油醚 40/60 萃取
_ m樣品 [g]
m燒杯[g]
mtotal[g]
% fat
樣品 1
4.8694
111.1307
112.2417
22.82
樣品 2
4.4356
111.0507
112.0589
22.73
樣品 3
4.4790
111.3114
112.3310
22.76
平均值
_
_ 112.0589
22.77
sd
_
_ 112.2417
0.04
rsd [%]
_
_ 112.0589
0.19
表6：測定牛肉末的脂肪含量(規(guī)格:13克/100克)，用石油醚 40/60 萃取
_ m樣品 [g]
m燒杯[g]
mtotal[g]
% fat
樣品 1
5.1349
111.1593
111.8055
12.58
樣品 2
5.2429
110.8860
111.5433
12.54
樣品 3
5.1339
111.3167
111.9520
12.37
平均值
_
_
_ 12.50
sd
_
_
_ 0.11
rsd [%]
_
_
_ 0.88
表7：測定牛肉末的脂肪含量(規(guī)格:13克/100克)，用乙醚40/60 萃取
_ m樣品 [g]
m燒杯[g]
mtotal[g]
% fat
樣品 1
5.0079
110.4678
111.1042
12.71
樣品 2
5.0111
111.2665
111.8964
12.57
樣品 3
5.0529
111.3072
111.9396
12.52
平均值
_
_
_ 12.60
sd
_
_
_ 0.10
rsd [%]
_
_
_ 0.79
5
結(jié)論
使用水解儀 h-506 和脂肪萃取儀 e-500 測定肉類產(chǎn)品中的脂肪提供了可靠且可重復(fù)的結(jié)果。結(jié)果與申報值一致，具有較低的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(rsd)。使用脂肪萃取儀 e-500 進行索氏萃取，20 個循環(huán)在大約 70 分鐘內(nèi)完成，對比傳統(tǒng)索氏節(jié)約大量的時間。如果對該脂肪萃取儀感興趣，可聯(lián)系我們進行更多了解。
6
參考文獻
extraction reports app
operation manual of hydrolex h-506
operation manual of fatextractor e-500