小鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒洗滌方法

發(fā)布時(shí)間:2024-07-08
小鼠層連蛋白/板層素(ln)elisa試劑盒洗滌方法:
1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
干4.每孔加hrp conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(od值)。應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
alpha actinin 4-loading controlα-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體
alkaline phosphatase堿性磷酸酶抗體
au1 tagau1 tag標(biāo)簽抗體
aebp1脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1
akt1蛋白激酶b
akt1蛋白激酶b
angl2血管生成素樣蛋白2抗體
angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗體
annexin i膜粘連蛋白 i抗體
annexin a2膜粘連蛋白 ⅱ抗體
atf1活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體
aquaporin 4 水通道蛋白4抗體
atf2活化復(fù)制因子2抗體
ampk beta 1腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
amylin糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體
angiotensin ii血管緊張素ⅱ抗體
at2r血管緊張素ⅱ受體1抗體
angiopoietin-1血管生成素-1抗體
annexin v膜粘連蛋白5抗體
annexin v重組膜粘連蛋白5抗體
alpha adaptin銜接蛋白α-adaptin抗體
apaf1(ct)凋亡蛋白活性因子-1抗體(c端)
apaf1(nt)凋亡蛋白活性因子-1抗體(n端)
abcg2三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白g超家族成員2抗體
apoe載脂蛋白e抗體
amyloid precursor protein淀粉樣肽前體蛋白抗體
aquaporin 2水通道蛋白-2抗體
agt血管緊張素原抗體
androgen receptor雄激素受體抗體
aven細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)
axin1軸蛋白1抗體
關(guān)鍵詞:洗板機(jī) 酶標(biāo)儀
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