前言
貓狗糧快遞被針管投毒”?最近,此網傳消息引眾多人關注。很快,消息被辟謠為假,讓不少寵物主人松了口氣。
寵物而今成為越來越多人的陪伴者,寵物用品市場也隨之不斷擴大,對寵物食品、寵物飼料的要求也越來越高。其中,膳食纖維對寵物腸胃功能的保護、促進作用越來越受到重視,許多寵物飼料產品將膳食纖維作為添加營養(yǎng)成分之一。
適當?shù)纳攀忱w維含量對寵物的營養(yǎng)攝入具有利好作用,準確測定產品中的膳食纖維含量,可明確產品的功能性、適用性、質量等。
本方案依照國標《gb 5009.88 食品安全國家標準 食品中膳食纖維的測定》,使用膳食纖維測定儀對寵物飼料中的總膳食纖維含量進行測定。
儀器
df06膳食纖維測定儀,sox606索氏提取儀,k1100全自動凱氏定氮儀,分析天平等。
實驗過程
儀器準備
1、將濾膜編號,于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為mg后,安裝于過濾漏斗中,并安裝至儀器相應位置處。
2、移取350 μl的熱穩(wěn)定淀粉酶溶液,溶于盛有50 ml的mes-tris緩沖液的酶瓶中;移取3.5 ml的10 mg/ml蛋白酶溶液,溶于盛有47 ml的mes-tris緩沖液的酶瓶中;移取700 μl的葡萄糖苷酶溶液,溶解于盛有50 ml的mes-tris緩沖液的酶瓶中,然后將酶瓶安裝至儀器相應位置處。
3、將酶解袋裝于儀器相應位置處。
樣品制備
精確稱取混勻后的樣品10~12 g(精確至0.1 mg)左右,記為mc。將稱好的樣品轉移至濾紙筒中。將盛有樣品的濾紙筒置于儀器萃取室內,向溶劑杯中加入沸程30~60℃的石油醚,儀器參數(shù)設置如下:
萃取模式
萃取時間
萃取溫度
試劑添加量
預干燥時間
索氏標準
270 min
65℃
100 ml
30 min
抽提完成后,將殘渣烘干至恒重,記為md。
總膳食纖維測定
準確稱取樣品1.0 g(精確至0.1 mg),記為m,并轉移置酶解袋中。設定酶解程序如下:
酶解
時間/min
溫度/℃
淀粉酶酶解
40
95
蛋白酶酶解
120
60
葡萄糖苷酶酶解
30
60
在葡萄糖苷酶酶解開始前,用3 mol/l的醋酸溶液調節(jié)酶解液ph(60℃下)至4.5±0.2(或可先添加5 ml的3 mol/l醋酸溶液后使用1 mol/l的氫氧化鈉溶液調節(jié)至該ph值)。設置沉淀及洗滌參數(shù)如下:
78%酒精沉淀添加量
260ml
沉淀時間
60 min
抽濾時間
3600 s
78%酒精沖洗用量
15 ml
95%酒精沖洗用量
15 ml
抽濾完成后,將附有殘渣的濾紙取出,放置于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為mgr。
不可溶性膳食纖維及可溶性膳食纖維測定
稱樣量及酶解的參數(shù)與與總膳食纖維測定方法相同,酶解結束后的洗滌參數(shù)設置如下:
抽濾時間
360 s
洗滌熱水用量
15 ml
抽濾完成后,將附有殘渣的濾紙取出,放置于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為mgr。將洗滌后的濾液收集在布氏漏斗下方的錐形瓶中,設置沉淀及洗滌參數(shù)如下:
78%酒精沉淀添加量
396ml
沉淀時間
60 min
抽濾時間
3600 s
78%酒精沖洗用量
15 ml
95%酒精沖洗用量
15 ml
沉淀完成后,在儀器上換裝另一套裝有恒重好的濾膜的漏斗及燒瓶,將沉淀好的溶液搖勻并倒入新的漏斗中抽濾。抽濾完成后,將附有殘渣的濾紙取出,放置于105℃烘箱中烘干至恒重并稱重為mgr。
計算
每兩份殘渣按照國標gb 5009.5,一份計算蛋白質質量mp;另一份置于馬弗爐中,于550℃下灰化3h測定灰分,計算灰分質量ma。
結果與討論
實驗結果
實驗選取的寵物飼料樣品經脫脂、酶解、抽濾、烘干恒重、測定蛋白和灰分后,得到實驗結果如下表所示:
樣品
稱樣量/g
損失因子
殘渣/g
殘渣蛋白質/g
殘渣灰分/g
總膳食纖維含量/%
均值/%
精密度/%
寵物飼料
1.0010
1.199
0.3555
0.1112
_ 15.33
15.69
4.65%
1.0122
0.3709
_ 0.0652
1.0042
0.3744
0.1181
_ 16.06
1.0050
0.3786
_ 0.0633
0.0000
0.0083
0.0052
_
_
0.0000
0.0074
_ 0.0009
結論
?
本次測試的寵物飼料的總膳食纖維含量為15.69%,精密度為4.65%,結果平行性良好。
參考文獻
[1] gb 5009.88 食品安全國家標準 食品中膳食纖維的測定[s].