【中國儀器網(wǎng) 使用手冊】色譜儀是一種用來進(jìn)行色譜分離分析的裝置，憑借其的分離能力以及準(zhǔn)確度較高的分析能力，在食品安全、工業(yè)生產(chǎn)、醫(yī)療制藥等領(lǐng)域都有較為廣泛運(yùn)用，在我們生產(chǎn)生活的各種領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。色譜儀的種類有很多，其中氣相色譜和液相色譜是較為常見的兩種色譜技術(shù)，今天我們就氣相色譜和液相色譜的異同做個(gè)簡單的講解。兩者的差異1. 流動相區(qū)別正如名字中所提及的，氣相色譜的流動相為惰性氣體，流動相與組分無親合作用力，只與固定相有相互作用；而液相色譜的流動項(xiàng)為液體，與組分間有親合作用。2.色譜柱長度的區(qū)別氣相色譜由于載氣的相對分析量較低，分子間隙大，故粘度低，流動性好，組分在氣相中流動速度快，因此可以增加柱長，以提高柱效，色譜柱長度也在幾米到幾十米不等；液相色譜的色譜柱通常在幾十到幾百毫米。3.分析樣品的選擇氣相色譜一般選擇相對分子質(zhì)量較小、低沸點(diǎn)、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性強(qiáng)的樣品；液相色譜一般用于分析高沸點(diǎn)、難揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差、分子質(zhì)量較大的液體化合物。4檢測限制氣相色譜使用時(shí)需要將樣品在氣化室氣化，需要較高的檢測溫度，并且采用的是尖頭進(jìn)樣針，液相色譜則不需要對樣品氣化，常溫即可檢測，同時(shí)采用的是平頭進(jìn)樣針。兩者的共同點(diǎn)氣相色譜和液相色譜的基本試驗(yàn)方法相似，本質(zhì)上，都是利用“相似相溶”試驗(yàn)方法，利用色譜柱進(jìn)行分離。同時(shí)在質(zhì)譜聯(lián)用領(lǐng)域，兩者都可以成為質(zhì)譜聯(lián)用儀很好的分離項(xiàng)使用。 有關(guān)液相色譜儀的系統(tǒng)組成介紹 液相色譜儀系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相；
被流動相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)；
在兩相中作相對運(yùn)動時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別；
被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀；
數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；
下面將分別敘述其各自的組成與特點(diǎn)。
進(jìn)樣系統(tǒng)
一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量是恒定的。
這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
輸液系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。
高壓泵的一般壓強(qiáng)為47～44x10pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時(shí)；
可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動速度；
這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。
流動相貯存器和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變；
包括改變洗脫液的極性、離子強(qiáng)度、ph值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。
這就可使各種物質(zhì)（即使僅有一個(gè)基團(tuán)的差別或是同分異構(gòu)體）都能獲得有效分離。
分離系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。
色譜柱一般長度為10～50cm（需要兩根連用時(shí)，可在二者之間加一連接管）；
內(nèi)徑為2～5mm，由優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成；
住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相（由基質(zhì)和固定液構(gòu)成）。
固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成；
它們都有惰性（如硅膠表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔徑可達(dá)1000?）和比表面積大的特點(diǎn)；
加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬（與氣相色譜中固定相的制備一樣）；
或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因（如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等）或配體的有機(jī)化合物。
因此，這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。
例如，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素（psa）后，就可以把成纖維細(xì)胞中的一種糖蛋白分離出來。
另外，固定相基質(zhì)粒小，柱床極易達(dá)到均勻、致密狀態(tài)，極易降低渦流擴(kuò)散效應(yīng)。
基質(zhì)粒度小，微孔淺，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。
根據(jù)柱效理論分析，基質(zhì)粒度小，塔板理論數(shù)n就越大。
這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小，會提高分辨率的道理。
再者，高效液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60c；
通過改善傳質(zhì)速度，縮短分析時(shí)間，就可增加層析柱的效率。